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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 用透析袋透析β-葡萄糖苷酶,透析袋底物溶解! 已有2人参与

大家好,我现在想纯化野生的β-葡萄糖苷酶,先用硫酸铵沉淀,再用透析袋除盐。每次透析的时候透析袋底部都破裂(可能是溶解),为什么出现这种情况,怎么解决。谢谢!
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霉菌
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elise1987

金虫 (著名写手)

是什么材料的透析袋?你的样品里面存在纤维素酶吗?是不是加磁力搅拌了,搅拌子有没有碰到过透析袋?
不折腾,不胡闹,珍惜时间和生命
2楼2016-06-07 11:46:57
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普通回帖

gxsulong

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by elise1987 at 2016-06-07 11:46:57
是什么材料的透析袋?你的样品里面存在纤维素酶吗?是不是加磁力搅拌了,搅拌子有没有碰到过透析袋?

醋酸纤维素材料的袋子,加了搅拌子但没碰到袋子。谢谢
霉菌
3楼2016-06-07 14:52:13
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)


你如果是在四度冰箱透析,绝对不可能

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2016-06-07 17:23:08
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木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gxsulong: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢,正准备这样试试。 2016-06-08 16:56:41
估计粗酶里面含有降解纤维素的酶了。如果目的酶耐乙醇的话,试试梯度乙醇沉淀,通过乙醇把酶沉淀,把盐分留在乙醇溶液的水分中。又或者超滤管低温离心分离。
为什么
5楼2016-06-07 18:02:31
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elise1987

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gxsulong: 金币+5, ★★★很有帮助, 查了一下,好像现在主要是以醋酸纤维素的袋子为主。您有其他材料的袋子品牌提供吗?谢谢 2016-06-08 16:57:54
引用回帖:
3楼: Originally posted by gxsulong at 2016-06-07 18:52:13
醋酸纤维素材料的袋子,加了搅拌子但没碰到袋子。谢谢...

如果有纤维素酶。换个材料的袋子试试
不折腾,不胡闹,珍惜时间和生命
6楼2016-06-08 09:58:18
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luckydog52

木虫 (著名写手)

装太多了, 至少留一半的膨胀空间啊。要不不爆才怪呢

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自信源于一次次成功的积累
7楼2016-06-08 13:01:28
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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by biosci at 2016-06-07 17:23:08
你如果是在四度冰箱透析,绝对不可能

是在冰浴中透析的。
霉菌
8楼2016-06-08 16:54:37
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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by luckydog52 at 2016-06-08 13:01:28
装太多了, 至少留一半的膨胀空间啊。要不不爆才怪呢

不是因为装满才爆的,是底部破裂。空间还有一半呢。
霉菌
9楼2016-06-08 16:58:45
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)


建议你剪碎部分透析袋,用酶液水解,然后dns试剂测还原糖含量

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10楼2016-06-09 08:57:05
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