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如何鉴定数据库中的目的基因是否是全长序列
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| 研究3个同工酶基因,因为是putative的,所以不知道数据库中的序列是否是该基因的全长,应该如何鉴定呢?其次,用该基因的蛋白序列反推cDNA序列,并转化了烟草,但是一直鉴定不到蛋白表达(western blot检测的HA,载体构建的时候在基因后面加了HA序列),有没有可能是因为不是基因的全长,所以基因没有表达成蛋白,所以western做不出来呢?如果是基因不是全长导致的,那么下一步是做RACE保险呢还是做个酵母表达更稳妥呢?因为想把该基因转化到植物中。谢谢了! |
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