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18328513224

新虫 (初入文坛)

[求助] 色谱柱堵上了,求助各位大神 已有6人参与

waters ACQUITY uplc beh C18( 1.7um,2.1×50mm.)色谱柱堵上了该怎么办啊?
前几天做丹参水溶性指纹图谱分析的时候压力越来越大,流动相用的甲醇-0.1%的甲酸水溶液,现在柱压只能冲到7000多,分析压力达到9000多甚至10000,,请问是不是析出的缓冲盐堵住了柱子,有什么解决办法啊,,

@wyy080214 发自小木虫Android客户端
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
编个方法:4分钟内,5%甲醇过渡至90%甲醇,流速0.5,柱温40。
进样选空白,进20针看看。

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4楼2016-06-06 17:18:57
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by HFMH at 2016-06-07 14:24:59
有个方法,就是把柱子两端的筛板清洗一下,然后用填料磨平两端再加上筛板,一般不建议这么做,如果经验不足会直接把柱子废掉,在柱子前端装个在线过滤器最好,要是还是不行,只能更换新柱子了。
...

这种拆柱子修复的方法只适合老式柱子。现在的柱子都是加压装填的。一旦把端板拆下填料就会溢出,根本无法复原。

试试加热(80度)反冲,用更强的溶剂(DMF,DMAc,THF-DCM-ACN-Hex混合液)注意用混合液前要先用IPA把水赶净。

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12楼2016-06-09 12:57:42
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yutong1104

新虫 (小有名气)

建议将色谱柱反接,用10的甲醇冲一个小时,再用甲醇冲1个小时,可以试试,我前几天就这么干的!

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5楼2016-06-06 17:50:51
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匿名

用户注销 (知名作家)

精修问题可私信


感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
2楼2016-06-06 08:43:34
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HFMH

至尊木虫 (知名作家)

有个方法,就是把柱子两端的筛板清洗一下,然后用填料磨平两端再加上筛板,一般不建议这么做,如果经验不足会直接把柱子废掉,在柱子前端装个在线过滤器最好,要是还是不行,只能更换新柱子了。

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7楼2016-06-08 06:24:59
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andana

金虫 (小有名气)

反冲一下吧。尽管这样对柱子寿命有影响,但有时反着用柱效反而会很好,实在不行,换跟柱子。
8楼2016-06-08 08:33:00
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shenglin01

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
将柱子反接,用水充分冲洗管路路径,流动相中水的比例稍大些,最好是再加0.1%硝酸,如不行可以将流动相换成酮,

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9楼2016-06-09 07:23:36
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九龙坡比咯

新虫 (小有名气)

上网站找到仪器厂家联系方式,有专业技术人员会帮你。前几天我用的毛细管电泳仪堵了就是咨询的工程师。

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生物方向学生
11楼2016-06-09 11:54:36
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月旭-小G

铁虫 (初入文坛)

可以反冲试试,先用高比例水相冲柱子,然后再用纯甲醇冲,纯甲醇冲的时间稍微久点,流速可以用您分析时流速的一半,柱子的出口端不要接检测器。一般做中药类的产品,物质比较复杂,很容易有强保留物质吸附在柱头端没有洗脱下来,导致柱压升高。对1.7um,2.1×50mm这种规格的柱子,建议是最好不要拆卸,一般拆卸开来是不大容易修好的,因为这种柱子里的填料本来就少,柱子一打开就卸压了,柱子很容易坏掉。
13楼2016-06-09 15:21:54
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普通回帖

18328513224

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lich666 at 2016-06-06 08:43:34
Uplc的柱子粒径小,容易堵,最好前面加根预柱。用坏了就换根吧,易耗品

主要是柱子是这里水产局的,我在这里做毕业设计,现在把人家柱子堵了,又付不起责任,只能求助解决办法了

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3楼2016-06-06 09:21:47
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yutong1104

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yutong1104 at 2016-06-06 17:50:51
建议将色谱柱反接,用10的甲醇冲一个小时,再用甲醇冲1个小时,可以试试,我前几天就这么干的!

10%

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6楼2016-06-06 17:51:47
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溜溜0109

新虫 (初入文坛)

反冲吧 请假有经验的人咨询一下

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10楼2016-06-09 09:22:17
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