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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 大家现在做大肠杆菌敲除应用无痕敲除的效果好吗？
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jiuzi59

铁杆木虫 (正式写手)
没有，构建质粒太麻烦，还不如大肠的两步同源重组，只要7天就是一个基因，这样的速度也不比Crispr/cas9的方法差了。
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11楼2016-06-03 17:07:21
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sunny0819

新虫 (小有名气)
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引用回帖:
10楼: Originally posted by elitewjj at 2016-06-03 06:30:01
有人试过Crispr/cas9敲除吗

原核还很少吧，主要针对真核的

发自小木虫Android客户端
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12楼2016-06-04 14:05:32
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七八的距离

铁虫 (正式写手)
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引用回帖:
6楼: Originally posted by jiuzi59 at 2016-06-01 13:13:26
是整个实验周期：今天做第一次同源重组，涂抗性平板；第二天在抗性平板上做菌落PCR验证，用PCR验证正确的
菌接菌过夜培养；第三天做二次重组，预培养菌液到负筛培养基中富集培养过夜；第四天过夜培养液在负筛抗性 ...

求具体的实验方法
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天道酬勤，地道酬善
13楼2016-06-23 09:05:59
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