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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 请问酵母菌始终培养不到一定的OD值怎么办
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

[求助] 请问酵母菌始终培养不到一定的OD值怎么办 已有1人参与

根据其他人文章上说的，想将一株含pPICZa质粒的菌培养到OD值到2~6之后加甲醇表达

文章上会说培养到2~6需要差不多2天的时间

可是我无论怎么培养OD值都只能到1.1~1.2左右，甚至培养到第五天也基本是这个值没变过

请问为什么不能继续增长了呢？我的是100mL的BMGY培养基

后来硬着头皮做下去做表达，表达量也不高
只能离心之后用之前一半的培养基重悬起来再诱导
但即使这样表达量还是不高


因为我要用表达产物做抑菌实验，所以实验当中一点抗生素都没加
之前因为没考虑过这个问题，所以也加过抗生素，但是最终结果都一样，OD值始终到不了2

请问如何解决这个问题呢？
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1楼 2016-05-31 08:57:17
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zywys2009

木虫 (小有名气)
几个问题问你一下：
1、菌株是那种？X33，GS115或是其他?
2、100ml培养基装在多大的摇瓶中？
3、培养温度及转速？
赞一下 回复此楼
2楼2016-06-01 09:50:35
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Victophe

铜虫 (小有名气)
培养基配方问题

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-06-01 11:29:56
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zywys2009 at 2016-06-01 09:50:35
几个问题问你一下：
1、菌株是那种？X33，GS115或是其他?
2、100ml培养基装在多大的摇瓶中？
3、培养温度及转速？

感谢回复！

是GS115，摇瓶是250mL的（实验室摇床没更大的了）

温度是30℃，转速200rpm
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2016-06-02 08:32:26
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zywys2009

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sdjnyxn123 at 2016-06-02 08:32:26
感谢回复！

是GS115，摇瓶是250mL的（实验室摇床没更大的了）

温度是30℃，转速200rpm...

建议加一些组氨酸到培养基中（pPICZa不含his4），另外250ml的药瓶装液量最好不要超过30%，建议20%，多摇几瓶。
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5楼2016-06-02 09:05:32
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莫知

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我培养酵母12小时od值都能达到10，是不是你的接种量太少了！
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6楼2016-06-10 20:32:34
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