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AWANGJIACUO

新虫 (初入文坛)

[交流] blast分析引物特异性及单引扩增

引物序列如下:
rs1801131F        TTCCTCTTCCCCTGCCTTTG       
rs1801131R        GAAGTCACAGCCCCGCAG       
扩增片段应该是262bp,但是电泳之后最亮的带是800bp左右,且260位置无带,下图是blast之后的结果,有连线的两个之间都是262bp,应该是该基因的不同版本,但800多的片段是什么原因呢?难道是单引扩增,正反向引物自身及彼此都无结构形成,Tm值仅相差0.4,唯一较大的差距是GC含量,这会造成单引扩增吗?还有就是向大家请教如何准确的分析blast之后的结果,不胜感激~~!

blast分析引物特异性及单引扩增
1-1.png
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好好活吧,因为我们会死很久。。。
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