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AWANGJIACUO

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[交流] blast分析引物特异性及单引扩增

引物序列如下：
rs1801131F TTCCTCTTCCCCTGCCTTTG
rs1801131R GAAGTCACAGCCCCGCAG
扩增片段应该是262bp，但是电泳之后最亮的带是800bp左右，且260位置无带，下图是blast之后的结果，有连线的两个之间都是262bp，应该是该基因的不同版本，但800多的片段是什么原因呢？难道是单引扩增，正反向引物自身及彼此都无结构形成，Tm值仅相差0.4，唯一较大的差距是GC含量，这会造成单引扩增吗？还有就是向大家请教如何准确的分析blast之后的结果，不胜感激~~！

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好好活吧，因为我们会死很久。。。

1楼 2016-05-27 14:59:08

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