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tangbowen

新虫 (小有名气)

克隆载体还是表达载体?用什么器皿摇的菌

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11楼2016-05-29 10:06:21
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yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by tangbowen at 2016-05-29 10:06:21
克隆载体还是表达载体?用什么器皿摇的菌

表达载体,用的大离心管

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12楼2016-05-29 13:30:53
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

如果是宿主菌提出来的,那可以转化到克隆菌后再提质粒!

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I am not a hero , but I served with heroes!
13楼2016-05-29 18:09:16
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tfytli

金虫 (职业作家)

我们用的omg的中提试剂盒,摇菌16个小时,15ml菌液,提出来一般有1微克每毫升,你这种情况可能是引入了杂菌,建议用提出来的质粒重新转化。

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最令人信服的话莫过于一本正经的胡说八道,外加一点数据。
14楼2016-05-29 23:12:13
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by yangyang1991 at 2016-05-28 18:42:12
试剂盒,生工的
...

建议买天根的好一点。

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15楼2016-05-29 23:15:37
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tangbowen

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yangyang1991: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-05-31 12:12:55
引用回帖:
12楼: Originally posted by yangyang1991 at 2016-05-29 13:30:53
表达载体,用的大离心管
...

建议用试管,离心管密闭性太强,而且,不是越久越好,表达载体本身拷贝数就不是很高,祝实验顺利

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16楼2016-05-30 07:28:38
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简简单单-婧

新虫 (小有名气)

重新做转化吧,估计是有杂菌了!

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17楼2016-05-31 00:01:54
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Tsingavin

木虫 (小有名气)

我浓度高的质粒,是自己配试剂手提,不用试剂盒

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分享是一种快乐
18楼2016-05-31 06:59:05
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夜影行风

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有人说在菌液中加氯霉素能提高质粒提取的浓度?不知是不是真的?哪位大神试过?求经验!
19楼2016-06-08 14:11:51
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wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

【答案】应助回帖

如果是低拷贝的话摇菌的时候可以考虑加点氯霉素诱导一下
20楼2016-06-08 15:56:55
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