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汕头大学海洋科学接受调剂
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小学生55555

新虫 (初入文坛)

[求助] 免疫荧光 已有3人参与

做免疫荧光的玻片怎么处理才比较好呢?为什么放入玻片爬片后就染菌了呢?求各位大神赐教!!!

@hc-material @gyesang 发自小木虫Android客户端
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小学生55555

新虫 (初入文坛)

2楼2016-05-26 23:42:43
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小小技术官

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先放置玻片的容器要高压灭菌;
玻片本身在使用前,在酒精里泡过夜,铺玻片之前,在酒精灯上灼烧;
保证细胞本身没有污染之外,种细胞到玻片的时候最好选用含有青链霉素的培养基;
操作种到玻片上细胞时要格外小心,注意外源污染;
进行免疫荧光染色的PBS等溶液确保是高压之后的;
染色结束后及时观察,避免长时间放置引起外源污染以及荧光淬灭。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

生活是一面镜子,要笑着面对!
3楼2016-05-27 22:58:47
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小学生55555

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小小技术官 at 2016-05-27 22:58:47
首先放置玻片的容器要高压灭菌;
玻片本身在使用前,在酒精里泡过夜,铺玻片之前,在酒精灯上灼烧;
保证细胞本身没有污染之外,种细胞到玻片的时候最好选用含有青链霉素的培养基;
操作种到玻片上细胞时要格外小 ...

用酒精灼烧对做免疫荧光没有影响吗?平常的玻片都是避光放置的。

发自小木虫Android客户端
4楼2016-05-27 23:22:52
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chuyinghao

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
去卧宏生物或者NEST买点吧,自己不用处理,人家都给你处理好了!
5楼2016-05-29 19:37:41
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qwbio123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

关于荧光淬灭的解决方法,可以采用Fluoromount-G抗荧光淬灭封片剂进行封片处理,其余的楼上讲的很详细了!http://www.bioconsumable.com/cn/tech/2016/5-26/news13553879.htm
6楼2016-05-31 16:22:59
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小小技术官

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小学生55555 at 2016-05-27 23:22:52
用酒精灼烧对做免疫荧光没有影响吗?平常的玻片都是避光放置的。
...

不是烤  是在酒精里泡了之后 粘着的酒精 一下就烧起来了
生活是一面镜子,要笑着面对!
7楼2016-06-03 20:14:39
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