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olivelmint

[交流] 为何用真菌的通用引物扩增不出条带?

大家好,最近在利用真菌的通用引物ITS1,4和ITS4,5来扩真菌,可是未见条带,不知是什么原因,是不是应该都能扩增出来,模板浓度是100ng左右,还有个问题就是大家在选用退火的温度的时候,是采用4(G+C)+2(A+T)来确定解链温度,再减少个3-5°来确定退火温度,还是直接用生物公司合成引物时给的推荐的温度的啊?谢谢了!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-5 20:40
用那个50mM Na+的Tm再增加3~5度
或者用软件设计给出的Tm减3~5度
有些软件会给出Ta值,就用那个或者再减1~2度也行
2楼2008-11-02 14:19:25
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