【答案】应助回帖

11楼2016-08-14 13:04:43

孤城画角

铜虫 (小有名气)

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你好，请问一下你最后转进去了没有，因为我也遇到了同样的问题，希望能相互交流一下。

12楼2016-11-05 10:16:23

2015202650

新虫 (初入文坛)

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楼主可以向您求一下质粒吗？之前用的Red重组做了半年多一直失败。想试试cas9

13楼2018-01-30 19:16:49

莫落

木虫 (正式写手)

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同意11楼，你可以加大菌量，多合并几管进行小提。当然如果只是验证质粒在不在，可以用菌落PCR。另外还要注意这个质粒要求菌的生长条件为30摄氏度。

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14楼2018-01-30 21:09:35

drwhoknowss

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【答案】应助回帖

有一种可能，只是猜想。origin of replication不兼容，在大肠杆菌复制的质粒，在产气肠杆菌未必。

Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner

15楼2018-01-31 01:15:30

渴望飞的鱼

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您好，前辈。我想问一下您用来鉴定pCas质粒的引物是什么呢？大约大约能扩增出多少bp的条带呢？您用的PCR程序是怎么的呢？我也在鉴定这个质粒，但是更据引物却没能扩增出条带来，估计是我的PCR程序不正确。所以想请教一下您的引物和程序。

16楼2018-03-09 13:25:44