24小时热门版块排行榜    

查看: 5948  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

8128sherry

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题 已有2人参与

我想问下大家做mtor和p-mtor的曝光时间都在多少,我做mtor曝光10分钟左右出来条带,但是有好多条。而P-mtor15和10分钟分钟太黑,5分钟又太白。但是我朋友说他那会做,曝光30分钟。。我就不知道我这个时间好像太短了啊。第一次做WB实验,再曝光问题上面没啥经验。。所以想请教一下

关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题
我想问下,这个出现这么多条带是为什么?抗体用的CST的,1:1000,二抗1::5000


关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题-1
这是内参bcta actin的
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljy910203

铜虫 (小有名气)

你好  楼主  最近刚刚做mtor的WB,怎么也没有结果,能不能请教下你的这个实验条件啊!方便的话能加个QQ吗,不胜感激
5656+12
7楼2016-07-08 16:24:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

jkbio2016

银虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
抗体特异性不好,或者说不同蛋白含有相同的抗原表位,就会产生非特异性条带,不用这么纠结,只要结果条带不是连在一起,进行条带分析不影响数值读取就行,放图的时候只截取你的目的蛋白条带就可以了。
2楼2016-05-27 09:36:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ikevin12345

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

http://www.ebioq.com/openlab/56/0,这个网站上有关于WB实验资料问答,你可以看着学习下。当初我们实验室为了节省时间,老板就让我送出去做了。我选择的这家,结果还不错,你可以看看。
3楼2016-05-30 10:00:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

8128sherry

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jkbio2016 at 2016-05-27 09:36:43
抗体特异性不好,或者说不同蛋白含有相同的抗原表位,就会产生非特异性条带,不用这么纠结,只要结果条带不是连在一起,进行条带分析不影响数值读取就行,放图的时候只截取你的目的蛋白条带就可以了。

但是这几个条带都集中在150-250,没法判断哪个是mTOR啊,这才是问题所在。
4楼2016-06-17 04:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:01 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
请填处理意见