应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题
51/1返回列表
查看: 5473  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

8128sherry

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题 已有2人参与

我想问下大家做mtor和p-mtor的曝光时间都在多少，我做mtor曝光10分钟左右出来条带，但是有好多条。而P-mtor15和10分钟分钟太黑，5分钟又太白。但是我朋友说他那会做，曝光30分钟。。我就不知道我这个时间好像太短了啊。第一次做WB实验，再曝光问题上面没啥经验。。所以想请教一下

关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题
我想问下，这个出现这么多条带是为什么？抗体用的CST的，1：1000，二抗1：:5000


关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题-1
这是内参bcta actin的
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-05-26 04:07:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljy910203

铜虫 (小有名气)
你好  楼主  最近刚刚做mtor的WB，怎么也没有结果，能不能请教下你的这个实验条件啊！方便的话能加个QQ吗，不胜感激
赞一下 回复此楼
5656+12
7楼2016-07-08 16:24:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

jkbio2016

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
抗体特异性不好，或者说不同蛋白含有相同的抗原表位，就会产生非特异性条带，不用这么纠结，只要结果条带不是连在一起，进行条带分析不影响数值读取就行，放图的时候只截取你的目的蛋白条带就可以了。
赞一下 回复此楼
2楼2016-05-27 09:36:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ikevin12345

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

http://www.ebioq.com/openlab/56/0，这个网站上有关于WB实验资料问答，你可以看着学习下。当初我们实验室为了节省时间，老板就让我送出去做了。我选择的这家，结果还不错，你可以看看。
赞一下 回复此楼
3楼2016-05-30 10:00:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

8128sherry

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jkbio2016 at 2016-05-27 09:36:43
抗体特异性不好，或者说不同蛋白含有相同的抗原表位，就会产生非特异性条带，不用这么纠结，只要结果条带不是连在一起，进行条带分析不影响数值读取就行，放图的时候只截取你的目的蛋白条带就可以了。

但是这几个条带都集中在150-250，没法判断哪个是mTOR啊，这才是问题所在。
赞一下 回复此楼
4楼2016-06-17 04:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 招08考数学 +4 laoshidan 2026-03-20 8/400 2026-03-22 19:56 by 小皮蛋酱
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +5 ￣^￣゜汗 2026-03-19 7/350 2026-03-22 19:44 by 公瑾逍遥
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +3 niko- 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:15 by 杨杨杨紫
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕，总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 暗涌afhb 2026-03-16 3/150 2026-03-20 00:28 by 河南大学校友
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭