应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题
51/1返回列表
查看: 5959  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

8128sherry

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题 已有2人参与

我想问下大家做mtor和p-mtor的曝光时间都在多少，我做mtor曝光10分钟左右出来条带，但是有好多条。而P-mtor15和10分钟分钟太黑，5分钟又太白。但是我朋友说他那会做，曝光30分钟。。我就不知道我这个时间好像太短了啊。第一次做WB实验，再曝光问题上面没啥经验。。所以想请教一下

关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题
我想问下，这个出现这么多条带是为什么？抗体用的CST的，1：1000，二抗1：:5000


关于大分子mtor和p-mtor 的WB问题-1
这是内参bcta actin的
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-05-26 04:07:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

8128sherry

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 314300420 at 2016-06-18 06:54:24
mtor是289吧，你的marker在250上方只有一个条带不是？
...

可是我看有的paper做出来，也不是都在250以上。。。不知道为啥
赞一下 回复此楼
6楼2016-06-21 03:57:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

jkbio2016

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
抗体特异性不好，或者说不同蛋白含有相同的抗原表位，就会产生非特异性条带，不用这么纠结，只要结果条带不是连在一起，进行条带分析不影响数值读取就行，放图的时候只截取你的目的蛋白条带就可以了。
赞一下 回复此楼
2楼2016-05-27 09:36:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ikevin12345

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

http://www.ebioq.com/openlab/56/0，这个网站上有关于WB实验资料问答，你可以看着学习下。当初我们实验室为了节省时间，老板就让我送出去做了。我选择的这家，结果还不错，你可以看看。
赞一下 回复此楼
3楼2016-05-30 10:00:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

8128sherry

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jkbio2016 at 2016-05-27 09:36:43
抗体特异性不好，或者说不同蛋白含有相同的抗原表位，就会产生非特异性条带，不用这么纠结，只要结果条带不是连在一起，进行条带分析不影响数值读取就行，放图的时候只截取你的目的蛋白条带就可以了。

但是这几个条带都集中在150-250，没法判断哪个是mTOR啊，这才是问题所在。
赞一下 回复此楼
4楼2016-06-17 04:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 5/250 2026-11-13 11:15 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:13 by Equinoxhua
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-13 10:55 by Equinoxhua
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:31 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 5/250 2026-11-12 11:14 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-12 10:38 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:36 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:27 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:08 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:41 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 02:23 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-12 00:44 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭