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ahooxmc

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE M形 鬼带原因是什么 已有1人参与

最近做SDS-PAGE(好久没有做过了),样品是原核表达的蛋白上清液(超滤管浓缩,并除盐)和菌体超声破碎后上清液(超滤管浓缩,并除盐),15% 分离胶。 电泳结果显示菌体破碎蛋白最前端的蛋白(小分子的)都呈现M形条带,邻近的上清蛋白及Marker 都相对正常? 有人遇到这种情况不,神马原因?

SDS-PAGE M形 鬼带原因是什么
M shaped.jpg
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jiangronglu

铁杆木虫 (职业作家)

分离胶太短,浓缩胶浓度好了,另外上样时菌体需要处理,可以煮沸10min,如果很稠的话可以采用离心,取上清上样,顺便控制上样量,12000转离心10min后上就OK了

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努力就有收获,人人都能成功
9楼2016-05-28 07:38:28
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lmqml24

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

2楼2016-05-25 13:49:08
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stabilized

银虫 (小有名气)

胶太浓了,低一点试试。另外配胶时仔细点,可能有点不均匀?

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坚持!
4楼2016-05-25 15:07:41
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xiangwebber

新虫 (初入文坛)

土豪,这么多样本不心疼啊。。。

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5楼2016-05-26 18:25:41
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