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小飞飞XF金虫 (小有名气)
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| 克隆版纳微型猪近交系DAZL(deleted in azoospermia like)基因,用生物信息学方法分析其序列特征,利用荧光定量和免疫印迹表达分析方法研究其在猪各组织中的表达情况。 从版纳微型猪近交系睾丸中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增猪DAZL基因全长编码区序列,并克隆这段序列,采用荧光定量和免疫印迹表达分析方法分析版纳微型猪近交系DAZL基因在不同组织中的表达情况。通过RT-PCR扩增得到DAZL基因全长编码区序列,生物信息学分析显示该基因编码区全长894 bp,编码295个氨基酸,GenBank登录号为HQ888860,蛋白质分子量(Mw)为33.01 kD,等电点(pI)为8.78,存在保守的RPM结构域和DAZ重复结构域,无信号肽,无跨膜结构,N端和C端均疏水,亚细胞定位于细胞核的概率是89%,多物种进化树分析表明猪DAZL蛋白与牛同源性高达95.6%,荧光定量和免疫印迹表达分析研究表明DAZL mRNA在BMI猪的睾丸组织中特异性表达。本研究成功克隆出了版纳微型猪近交系DAZL基因全长编码区序列,对其在各个组织中的表达情况进行了分析,并对其编码的蛋白质功能进行了预测,为进一步研究猪DAZL基因的表达调控奠定了研究基础。 |
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