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rhy1027

金虫 (正式写手)

[交流] 做体外转录效率太低 已有1人参与

如题。做了好几遍的体外转录,效率都很差!是线性化模版出了问题?还是转录试剂用的不对?

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饿的神啊

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,不知道你的问题解决了吗。我最近也在做体外转录,想要体外转录dsRNA,已经在上下游引物的5'端都加了T7启动子序列,但是胶回收得率很低,只有大概40ng/ul,远达不到体外转录试剂盒要求的起始模板量,所以想将PCR产物克隆到带T7启动子的载体上,比如pEASY-T1-simple,现在问题是这类的载体的T7启动子离插入片段都至少有几十bp的距离,我想问这几十bp的非目的片段是否会影响体外转录后生成的dsRNA。你线性化用的是什么载体啊
2楼2017-09-15 12:33:50
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