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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 培养基的筛选
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VMuse

新虫 (初入文坛)

[求助] 培养基的筛选 已有2人参与

想知道对培养大肠杆菌的基础培养基进行筛选，做了平板以后，要根据哪些标准来判定生长的好，比如，菌落数，菌落大小，还有什么其他的么？有没有参考的文献！！！

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1楼 2016-05-16 15:03:54
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a2703521

金虫 (小有名气)

123

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你做的是不是工程菌呢？是要诱导蛋白还是要收菌体或者说是产酶，每种需要的结果判定方式都不一样的。如果是产蛋白就测蛋白量，如果产酶就测酶活力，如果要菌体就测菌体量或者OD600的值。根据自己需要来定，看菌落很难判定的
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2楼2016-05-16 16:40:10
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VMuse

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a2703521 at 2016-05-16 16:40:10
你做的是不是工程菌呢？是要诱导蛋白还是要收菌体或者说是产酶，每种需要的结果判定方式都不一样的。如果是产蛋白就测蛋白量，如果产酶就测酶活力，如果要菌体就测菌体量或者OD600的值。根据自己需要来定，看菌落很 ...

不是呀，我就是要证明哪种培养基适合大肠杆菌的生长，没有那么麻烦啦，我才第一步就是筛选基础培养基，比较哪个培养基更合适。

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3楼2016-05-17 08:34:26
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a2703521

金虫 (小有名气)

123
引用回帖:
3楼: Originally posted by VMuse at 2016-05-17 08:34:26
不是呀，我就是要证明哪种培养基适合大肠杆菌的生长，没有那么麻烦啦，我才第一步就是筛选基础培养基，比较哪个培养基更合适。
...

那就直接检测菌体浓度就行了，哪种培养基的菌体浓度高就用哪种。常用的大肠杆菌培养基文献很多都可以查到
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4楼2016-05-17 10:18:58
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VMuse

新虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by a2703521 at 2016-05-17 10:18:58
那就直接检测菌体浓度就行了，哪种培养基的菌体浓度高就用哪种。常用的大肠杆菌培养基文献很多都可以查到...

想问问怎么检测菌体浓度，是在培养基上挑去一个单个菌落然后接入LB液体培养基上，过夜培养，然后再用培养好的菌液涂布画平板么？

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5楼2016-05-18 14:19:18
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VMuse

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by VMuse at 2016-05-18 14:19:18
想问问怎么检测菌体浓度，是在培养基上挑去一个单个菌落然后接入LB液体培养基上，过夜培养，然后再用培养好的菌液涂布画平板么？
...

画平板以后还要计数然后计算是么？检测菌体浓度就能证明哪个培养基更好，这样的理论有可依据的文献或者标准么

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6楼2016-05-18 14:20:47
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123hzgd

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不用做成平板的，你这就是测量菌数的
1、直接活化一定种子液，按同样接种量接种到相同体积的不同培养基中，600nm下紫外分光光度计测od值就好，od值越大越好
2非要用平板的话，还是活化同一批种子液，稀释到一定的相同的倍数（自己选择），取相同的量涂布到不同固体培养基倒的平板上，计数菌数多少，菌落越多越好
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7楼2016-05-18 15:33:09
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VMuse

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 123hzgd at 2016-05-18 15:33:09
不用做成平板的，你这就是测量菌数的
1、直接活化一定种子液，按同样接种量接种到相同体积的不同培养基中，600nm下紫外分光光度计测od值就好，od值越大越好
2非要用平板的话，还是活化同一批种子液，稀释到一定的 ...

谢谢！

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8楼2016-05-19 13:45:15
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