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sdjnyxn123银虫 (小有名气)
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[求助]
请问将蛋白表达产物做抑菌实验的话,必须要用纯化过的蛋白吗?
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我的蛋白表达上清液一直纯化不了,但是还是先做了下抑菌实验试了下 没有看到有抑菌圈 那么在纯化之后是不是也看不到抑菌圈了?纯化与否会影响到抑菌效果吗? 个人以为在抑菌实验中,纯化与否是为了排除其他蛋白的影响,但如果表达不出抑菌活性的话,是不是就说明目的蛋白没有足够的抑菌活性了呢? 另外我培养的病原菌在涂布的时候没有特别硬性的要求(CFU到多少),一般都是培养个10h左右就涂了 如果菌液浓度过大的话是不是也会影响实验结果呢? 另外,做抑菌实验的话,是加纯化后的蛋白(细胞破碎后的上清液或者复性后的包涵体),还是直接加重组菌呢? |
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