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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 银染新手，图太奇怪了求指教
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孙妙妙

金虫 (小有名气)

[交流] 银染新手，图太奇怪了求指教

最近在做SSR，然后用了银染，染出来的条带很奇怪，求指教，不胜感激。
用的实验条件（5%的PAGE胶）
1.水洗2次，每次8min
2.银染（0.2%AgNO3）10min
3.水洗2次，每次1min
4.显色（1.5%NaOH,每1L加1.5ml甲醛）
5.终止
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    • 2016-05-14 20:27:14, 8.65 M

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好好做实验！
1楼 2016-05-14 20:27:19
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mexy2008

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
孙妙妙: 金币+2, 谢谢 2016-06-17 23:36:17
上摇床，可均匀；
硝酸银浓度可以适当降低，0.12-0.15就够；
显色时间好好把握，看到条带就要停止显色，否则会染过头。
祝好运！
赞一下 回复此楼
3楼2016-05-28 23:02:23
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kaobo2012

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
孙妙妙: 金币+1, 谢谢，这尽量保持了，但效果还是不好 2016-05-15 22:37:53
孙妙妙: 金币+2, 谢谢 2016-06-17 23:36:29
背景不均匀。这个实验灵敏度高，试剂、耗材都要洁净，还要在摇床上，总之尽量不要污染、保证各个缓冲液洁净、均匀。要小心、多做几次，就算经常做的老手，也不能保证每次都有好结果。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2016-05-14 23:10:26
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