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lys6827

木虫 (著名写手)

[交流] 用克隆挑选杂合子的困惑? 大侠,进来帮忙解释下

我在使用克隆技术把核基因序列上的杂合子分开的时候,发现经常出现下面这种情况:说明220(A/T),220是核苷酸位点,(A/T)是表明有杂合子,且是A/T杂合子
例如
220(A/T); 530 (A/G); 650(A/G); 690(T/G)
我挑了20个克隆(做的是菌落PCR),测序(ABI3730,Bigdye3.1)之后,统计出来的结果是:
大部分是AAGG和TGAT,但是也有部分的结果呈现的有AAAT,TGAT,AGAT
这种看起来是发生了交换,但是这种交换是发生克隆或者是PCR的哪一步呢?
个人觉得发生在哪一步都觉得怀疑。
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