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自己的style

新虫 (小有名气)

[求助] 总黄酮和胡桃醌测定中的问题 已有1人参与

我测定的是胡桃楸叶片中的总黄酮含量,用芦丁标准品,用60%乙醇溶解得到0.2mg/ml的标准溶液后,分别取5、4、3、2、1、0.5ml的标准溶液与10ml的试管中,加入60
5乙醇至5ml后,加入5%的亚硝酸钠 0.3ml,摇匀静置6min,加入10%的硝酸铝 0.3ml,摇匀静置6min,加1mol/L的氢氧化钠 4ml,用水稀释或用60%乙醇稀释至刻度,摇匀放置15min后,510nm测定吸光值,空白试剂为对照,为什么空白对照吸光值不为0,不稳定,且标液吸光值都大与2,是不是浓度太高了啊,跪求!测定过程中,需要避光吗?

  高压液相测定胡桃醌含量时,需要全程避光吗?
胡桃醌和芦丁待测液应该怎么保存呢?
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Yakushi cong

新虫 (小有名气)

对呀,兄弟。。用0.x ml 做标线就可以啦

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2楼2016-05-11 15:00:24
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品溶液是否稳定,你自己没试过?胡桃醌确实有点不稳定,那也没那么特别。你需要确定样品溶液的稳定性。若在测定总黄酮过程中,空白对照就是你测定过程的对照,是相对值。芦丁溶液比较稳定,保持在冰箱里就可以了,而胡桃醌不稳定,不建议在溶液中保存。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2016-05-11 17:46:51
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自己的style

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Yakushi cong at 2016-05-11 15:00:24
对呀,兄弟。。用0.x ml 做标线就可以啦

我的梯度是0.1;0.08;0.06;0.04;0.02;0.01mg/ml.我看做我这个材料的,浓度梯度也是这样的,标曲一般都是0.0823x-0.0034,按这个公式的话,浓度为0.1的时候,吸光值0.0078,你做的标曲大概也是这样吗?

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4楼2016-05-11 18:52:06
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自己的style

新虫 (小有名气)

5楼2016-05-11 18:52:21
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自己的style

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2016-05-11 17:46:51
样品溶液是否稳定,你自己没试过?胡桃醌确实有点不稳定,那也没那么特别。你需要确定样品溶液的稳定性。若在测定总黄酮过程中,空白对照就是你测定过程的对照,是相对值。芦丁溶液比较稳定,保持在冰箱里就可以了, ...

测定总黄酮过程中用避光吗?我知道测定核桃醌得避光,现在问题是我的芦丁标曲吸光值都很大,而且还不稳定,标曲浓度方法跟别人做过的一样,不知道为什么空白和标曲供试液都不稳定,望指教。

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6楼2016-05-11 20:12:28
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 自己的style at 2016-05-11 20:12:28
测定总黄酮过程中用避光吗?我知道测定核桃醌得避光,现在问题是我的芦丁标曲吸光值都很大,而且还不稳定,标曲浓度方法跟别人做过的一样,不知道为什么空白和标曲供试液都不稳定,望指教。
...

测定总黄酮的过程,手工太繁琐,且难重复,本来就不看好,且误差较大,有点科研消化。芦丁标准曲线的建立,也需要适当考虑浓度,且很多文献的校正值不同,只能是自己用。空白数据应该稳定,看你的加入试剂的过程是否稳定(试想,手工操作,误差有点大),所以,通常都是多次重复,获得一统计数据。
7楼2016-05-11 20:46:13
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海豚彦彦

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 自己的style at 2016-05-11 20:12:28
测定总黄酮过程中用避光吗?我知道测定核桃醌得避光,现在问题是我的芦丁标曲吸光值都很大,而且还不稳定,标曲浓度方法跟别人做过的一样,不知道为什么空白和标曲供试液都不稳定,望指教。
...

芦丁标液放冰箱不会有析出吗,能放多久呢?

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8楼2016-05-11 21:21:35
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自己的style

新虫 (小有名气)

我放了有五天了,没有析出。

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9楼2016-05-11 23:25:27
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钱衡宇

新虫 (初入文坛)

为什么用510nm的紫外波长测吸光度吗???妹子求解

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10楼2017-02-27 20:36:33
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