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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 啥标记都没有的质粒，脂质体转染进真核细胞，怎么筛选稳定克隆？
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匿名

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1楼 2016-05-09 14:29:23
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aoluoquan

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你们老师就是2B，他给你出的主意太馊

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2楼2016-05-09 15:32:42
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aoluoquan

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by becklittle at 2016-05-09 16:56:36
那咋办呢
...

就两种选择，要么给你的质粒加上荧光或抗性，要么把你的基因移到有荧光或抗性的质粒里，这比你提DNA做pcr方便，那样还不work

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4楼2016-05-09 17:10:02
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匿名

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3楼2016-05-09 16:56:36
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5楼2016-05-09 19:23:24
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sayen

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
即使你构建成功了，以后细胞丢了这个基因你也不知道

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6楼2016-05-11 11:40:57
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-05-12 08:17:07
你老板的建议并不是瞎说，抗性质粒共转确实可以这么做，只是效率有些低
共转后最好挑出来单克隆，多挑几个单克隆就能成功
单克隆可以做pcr或者wb来验证
不过如果我自己做的话，我大概就重新克隆个带抗性或者荧光的质粒了，毕竟重新克隆一个也就不到一个星期
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
7楼2016-05-12 05:43:53
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howardchichi

木虫 (职业作家)
建议听老板的，欲速则不达，楼主慢慢来，不会错的。

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8楼2016-05-12 06:12:39
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9楼2016-05-12 12:16:47
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10楼2016-05-12 12:18:29
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