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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 5‘UTR扩增不完整
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龙城112

金虫 (小有名气)

112

[求助] 5‘UTR扩增不完整 已有3人参与

那位大神能够给予帮助，我扩增一个基因的5‘UTR，但总是扩增不完全，差300bp左右，请问用什么方法能够有效的完整的扩增5‘UTR，谢谢！
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自生自灭
1楼 2016-05-08 20:06:39
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sayen

银虫 (小有名气)
3'utr是连续的，不像CDS区那样需要多个外显子拼接，因此可以直接从基因组扩增。5’utr我没做过，楼主可以看看是不是可以从基因组直接扩

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7楼2016-05-11 11:30:10
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tangbowen

新虫 (小有名气)
我记得师母跟我说，这个扩不全，她说要用takara自己的5'试剂盒，所有操作都在RNA水平上，不过现在停产了，我不做转剧调控，不太懂，估计你只能提高模版RNA的质量了

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4楼2016-05-08 20:48:21
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普通回帖

Fleaves

至尊木虫 (著名写手)
5'RACE
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2楼2016-05-08 20:30:57
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龙城112

金虫 (小有名气)

112
引用回帖:
2楼: Originally posted by Fleaves at 2016-05-08 20:30:57
5'RACE

我用的就是Smarter RACE 试剂盒，一直扩不全

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自生自灭
3楼2016-05-08 20:41:01
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龙城112

金虫 (小有名气)

112
引用回帖:
4楼: Originally posted by tangbowen at 2016-05-08 20:48:21
我记得师母跟我说，这个扩不全，她说要用takara自己的5'试剂盒，所有操作都在RNA水平上，不过现在停产了，我不做转剧调控，不太懂，估计你只能提高模版RNA的质量了

怎么在RNA水平上做呢？谢谢

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自生自灭
5楼2016-05-08 21:04:42
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Sunshine092

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我用过takara的  5’-Full RACE Kit with TAP这个试剂盒 不过现在官网没的卖了 官网上有替代品 至于替代品能不能扩增完全，我就不知道了 http://www.takara.com.cn/Info.aspx?m=20141221174835060507
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龙城112
6楼2016-05-11 11:07:21
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龙城112

金虫 (小有名气)

112
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by Sunshine092 at 2016-05-11 11:07:21
我用过takara的  5’-Full RACE Kit with TAP这个试剂盒 不过现在官网没的卖了 官网上有替代品 至于替代品能不能扩增完全，我就不知道了 http://www.takara.com.cn/Info.aspx?m=20141221174835060507

谢谢

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自生自灭
8楼2016-05-12 00:26:49
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龙城112

金虫 (小有名气)

112
引用回帖:
7楼: Originally posted by sayen at 2016-05-11 11:30:10
3'utr是连续的，不像CDS区那样需要多个外显子拼接，因此可以直接从基因组扩增。5’utr我没做过，楼主可以看看是不是可以从基因组直接扩

谢谢

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自生自灭
9楼2016-05-12 00:27:29
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wbj1933

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

做个载体试试吧。。。。5段不完全我记得大多数是片段过长，可以试试构建载体或者用环化的方式做
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10楼2016-05-19 10:28:23
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