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13611284100

新虫 (正式写手)

[求助] 关于链霉菌 已有1人参与

我想要表达链霉菌中的一个蛋白,从NCBI查到了基因,想问问用不用提链霉菌RNA进行反转录PCR扩增基因,还是提基因组直接PCR就行 @天使托
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632362481

铜虫 (小有名气)

你的意思是cDNA扩增,还是提取基因组扩增吧,取决于你用的表达载体吧。
。。。
2楼2016-05-13 09:18:53
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)


3楼2016-05-13 10:12:51
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)


直接用基因组dna做pcr就行了

发自小木虫Android客户端
4楼2016-05-13 10:13:28
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yanfengzhou

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 13611284100 at 2016-05-07 18:59:35
我想要表达链霉菌中的一个蛋白,从NCBI查到了基因,想问问用不用提链霉菌RNA进行反转录PCR扩增基因,还是提基因组直接PCR就行 天使托

请问你的链霉菌pcr做出来了没有?有问题请教。

发自小木虫Android客户端
5楼2017-02-26 19:56:25
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

看你在哪表达了,如果还在链霉菌里表达的话就不用反转录了,直接用基因组pcr就好,如果在细菌里做,就要用cDNA为模板来做了
···
6楼2017-02-27 16:12:24
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szp0401

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小冀- at 2017-02-27 16:12:24
看你在哪表达了,如果还在链霉菌里表达的话就不用反转录了,直接用基因组pcr就好,如果在细菌里做,就要用cDNA为模板来做了

链霉菌是原核,应该没有内含子吧,为啥还要用cDNA做模板呢
7楼2017-07-19 10:13:23
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
7楼: Originally posted by szp0401 at 2017-07-19 10:13:23
链霉菌是原核,应该没有内含子吧,为啥还要用cDNA做模板呢...

不好意思,我以为它是真菌呢,好像是放线菌,这样的话如果启动子没有问题的话应该可以直接表达吧
···
8楼2017-07-20 08:47:43
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