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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 关于链霉菌
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13611284100

新虫 (正式写手)

[求助] 关于链霉菌 已有1人参与

我想要表达链霉菌中的一个蛋白，从NCBI查到了基因，想问问用不用提链霉菌RNA进行反转录PCR扩增基因，还是提基因组直接PCR就行 @天使托
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1楼 2016-05-07 18:59:35
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632362481

铜虫 (小有名气)
你的意思是cDNA扩增，还是提取基因组扩增吧，取决于你用的表达载体吧。
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。。。
2楼2016-05-13 09:18:53
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
链霉菌jiu

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3楼2016-05-13 10:12:51
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
直接用基因组dna做pcr就行了

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4楼2016-05-13 10:13:28
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yanfengzhou

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 13611284100 at 2016-05-07 18:59:35
我想要表达链霉菌中的一个蛋白，从NCBI查到了基因，想问问用不用提链霉菌RNA进行反转录PCR扩增基因，还是提基因组直接PCR就行 天使托

请问你的链霉菌pcr做出来了没有？有问题请教。

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5楼2017-02-26 19:56:25
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

看你在哪表达了，如果还在链霉菌里表达的话就不用反转录了，直接用基因组pcr就好，如果在细菌里做，就要用cDNA为模板来做了
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···
6楼2017-02-27 16:12:24
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szp0401

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小冀- at 2017-02-27 16:12:24
看你在哪表达了，如果还在链霉菌里表达的话就不用反转录了，直接用基因组pcr就好，如果在细菌里做，就要用cDNA为模板来做了

链霉菌是原核，应该没有内含子吧，为啥还要用cDNA做模板呢
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7楼2017-07-19 10:13:23
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
7楼: Originally posted by szp0401 at 2017-07-19 10:13:23
链霉菌是原核，应该没有内含子吧，为啥还要用cDNA做模板呢...

不好意思，我以为它是真菌呢，好像是放线菌，这样的话如果启动子没有问题的话应该可以直接表达吧
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···
8楼2017-07-20 08:47:43
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