24小时热门版块排行榜    

查看: 1046  |  回复: 16
当前主题已经存档。

pph0259

木虫 (正式写手)

蛋白含量测定:
Bradford贮存液:100 ml 95%乙醇,200 ml 88%磷酸,350 mg 考马斯亮蓝G-250。室温下长期保持稳定。
Bradford工作液:425 ml双蒸水,15 ml 95%乙醇,30 ml 85%磷酸,30 ml Bradford贮存液,Whatman 1号滤纸过滤,置于棕色瓶中,保存于室温,可使用数周,但在使用前要再过滤。


用Bradford法测定蛋白质浓度,以牛血清白蛋白作为标准蛋白,配制成1 mg/ml标准溶液,选择2.5 ~20 g的不同用量,定容至100 l,然后加入1 ml Bradford工作液并振荡混匀,在2 min后在595 nm处测定吸收值,测量应在1 h内完成。线性回归后得到吸光度-BSA量标准曲线为:
y = 0.0291x + 0.0383          R2 = 0.9999
x-BSA (g)                  y-吸光度A595               
样品检测同上法,用适当稀释样品代替牛血清白蛋白,测量待测样品的A595,从BSA标准曲线中确定待测样品的浓度。




[ Last edited by pph0259 on 2008-10-30 at 19:55 ]
11楼2008-10-30 19:54:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周晓丽

酪蛋白溶液可保存几天?
12楼2008-10-30 21:15:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周晓丽

多谢,我还想问一下那个标准曲线方程是怎么得出来的呀?我每天都要测样品,每测一个样都要从新绘制吗?
13楼2008-10-30 21:21:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

coffee424907

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 周晓丽 at 2008-10-30 14:36:
我要测胃液中胃蛋白酶活性,需要绘一个标准曲线,我一天杀四只鸡,测每只鸡都要从做一次标准曲线吗

幸福的研究工作
14楼2008-10-30 22:52:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smallcat227

木虫 (著名写手)

标准曲线,严格说来是要每次做实验都单独绘制的,但实际上没必要这么严格吧,那些温度、湿度、个人心情等等的影响在要求不是很严格的情况下还是可以忽略的……

我们也是用考马斯亮蓝法,简单嘛,用牛血清蛋白(BSA)做标线
15楼2008-10-30 23:08:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asbghj

在一天内完成,应该不需要每次都作标准曲线的吧
16楼2008-10-31 09:52:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周晓丽

酶稀释倍数问题

我需要从胃食糜中提取胃蛋白酶,但我离心后没有消化液,如果先加点蒸馏水再离心,我又担心计算酶活性时,稀释倍数好如何计算。能否再举个例子。
17楼2008-10-31 13:14:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蛋黄派 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +16 基诺咪客 2026-08-17 20/1000 2026-08-20 12:44 by 201120518022
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +16 Ldrop2023 2026-08-13 20/1000 2026-08-20 11:07 by xskun
[基金申请] 言之凿凿,8月21号(明天)放榜 +12 医学老男孩 2026-08-20 14/700 2026-08-20 10:53 by ran2233
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 21/1050 2026-08-20 10:37 by Vivilian
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 125/6250 2026-08-20 09:02 by 医学老男孩
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见