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robelmann

木虫 (小有名气)

[求助] 求TMB的在652的摩尔吸光系数，有人知道不 已有1人参与

求TMB的在652的摩尔吸光系数，酶的反应动力学求米氏常数，以及Vmax需要用到摩尔吸光系数，因为都是通过吸光度进行转换的。
看了些期刊论文和学位论文都没有找到这个数值，在论坛里看到有帖子提到说是39000，但是没有看到文献出处，比较头疼，有大神知道不，麻烦告知下
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1楼 2016-05-05 11:10:41
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雨梦无声

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
robelmann: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-05-10 15:14:43
39000没错，想要文献可以看看RSC数据库Analyst杂志DOI：10.1039/c3an00560g文章的补充材料部分
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2楼2016-05-05 22:07:20
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robelmann

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2016-05-05 22:07:20
39000没错，想要文献可以看看RSC数据库Analyst杂志DOI：10.1039/c3an00560g文章的补充材料部分

嗯 我后来再别的文献里也找到了 是ACS里面一篇比较老的，找这个玩意找得比较头疼，
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3楼2016-05-10 15:15:26
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robelmann

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2016-05-05 22:07:20
39000没错，想要文献可以看看RSC数据库Analyst杂志DOI：10.1039/c3an00560g文章的补充材料部分

你是做这块研究的么？
请教几个问题：1.在oxTMB紫外曲线的时候，从全波上看可以看出来TMB的曲线都是有基线漂移的现象，那么652 nm的Abs值，你都是怎么读出来的？ 直接读取？还是将所有的曲线拉到同一个平面上读取？这样操作误差是不是很大？
2.关于酶的pH选择的问题，看到有文献pH从2-12的，用的NaAc缓冲溶液。。这个缓冲能调节到2，具体是怎么调节的？我看冰乙酸的pH差不多是2左右了，缓冲溶液应该有个缓冲的范围，pH太小或者太大都是直接用强酸强碱？
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4楼2016-05-10 15:24:07
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雨梦无声

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by robelmann at 2016-05-10 15:24:07
你是做这块研究的么？
请教几个问题：1.在oxTMB紫外曲线的时候，从全波上看可以看出来TMB的曲线都是有基线漂移的现象，那么652 nm的Abs值，你都是怎么读出来的？ 直接读取？还是将所有的曲线拉到同一个平面上读取 ...

做一些这方面的。1.确定最大吸收后不需做扫描，固定最大吸收波长读数即可。2.缓冲液的选择看情况，反正最好的缓冲范围是pKa+-1，至于你选什么缓冲体系查查文献或者看看分析化学手册。
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5楼2016-05-10 17:20:22
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