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樱花花开

新虫 (小有名气)

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9楼: Originally posted by sloop112 at 2016-05-05 10:33:02
不知楼主最近实验顺利否?
    长片段的克隆一般会采用分段PCR酶切纯化后再连接,也可以使用重组酶的方式,该效率相比前者高很多,祝楼主顺;

你好,我想问下,ABC三片段连接,先把AB以酶切位点连上,可为什么用同样的方法却连不上AB和c呢

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开心
11楼2016-07-29 15:38:03
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樱花花开

新虫 (小有名气)

楼主,可以告诉我,多片段连接的经验吗

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开心
12楼2016-07-29 15:38:48
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樱花花开

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2016-05-02 11:31:47
你P的好长啊。。。话说,你可以试试无缝连接。。如果非要用普通的酶切连接,可以考虑试一下T4+PEG4000连接。另外,我之前做长一点的(也没你那么长)我是这么做的:片段1后面加上酶切位点A\B\C,然后片段1连接到载体 ...

你好,我想问一下你酶切连接方法中,终止子不是应该放在酶切位点前面吗?那如果这样的话,就算消化连接上,最后一个片段也用不上啊

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开心
13楼2016-07-29 15:44:22
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