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mtz0305

金虫 (小有名气)


[交流] Gibson连接

近期想用Gibson 做一个质粒  分别4000 3000 2800三个片段,结果连了n次就连不出来,该注意的地方都注意了, 实在不知道哪里出了问题,真是快疯了,想死的心都有。。。。求各位大神帮助呀!!
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sony8620

铁杆木虫 (文学泰斗)



mtz0305(金币+1): 谢谢参与
6楼2016-04-29 21:13:24
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)



mtz0305(金币+1): 谢谢参与
建议花点钱找人做

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13楼2016-04-29 21:36:55
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十五进制

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是呢,请问楼主找到原因了么
22楼2016-05-13 16:23:52
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sayen

银虫 (小有名气)


23楼2016-05-13 23:30:16
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肥猫p

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这三个片段都不算太大啊,我用gibson效率还 挺好的,前几天4个一起连也长了几十个,其中一半以上都是对的。
你有没有做个对照,看看是不是试剂盒质量问题?再核对一下,你的重叠接头有没有错误。
加油!
24楼2016-05-15 11:32:48
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030Selma

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主找到为什么了吗,我现在也做不出来

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25楼2017-09-11 21:28:56
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15623507725

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可以先做一个overlap将两个片段连接,然后再用Gibson将另外一个片段连接起来。
26楼2018-03-19 15:43:54
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
加在一起也有10kb,这种大质粒本身的确不容易做
27楼2018-03-19 21:49:02
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xinxinjin

银虫 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,我用T4连接酶 也连不上,

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28楼2019-04-04 15:59:56
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简单回复
yaoyao1452楼
2016-04-29 20:55   回复  
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gengxin603楼
2016-04-29 21:00   回复  
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祝福
syhorchid4楼
2016-04-29 21:10   回复  
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moychan7楼
2016-04-29 21:15   回复  
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2016-04-29 21:18   回复  
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hbl2159楼
2016-04-29 21:24   回复  
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ZloveA12楼
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SilenceGoo14楼
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Frank-li16楼
2016-04-29 21:50   回复  
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2016-04-29 21:54   回复  
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Anita_123420楼
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Anita_12321楼
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