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lainaxior414

金虫 (正式写手)

[求助] 两种同分异构体用HPLC不能分离,如何改变流动相? 已有3人参与

最近在做百里香酚和香芹酚的HPLC,流动相文献上说是甲醇:水:冰醋酸(60:40:2),两个都会出峰。但我实际单独做两个对照品时,一个是18.9min出峰,一个是19.9min出峰,用样品做两种物质却不能分离,19~20min只出现一个峰,请问各位流动相该如何改变?

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上海波粒

铜虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
调整有机比例,调整洗脱能力,改变色谱柱保留能力,这两个物质保留值太近了,要去不停的试
2楼2016-04-24 12:33:39
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
通过筛选缓冲盐溶液种类及不同的PH值,并优化梯度洗脱模式,用一般的反相柱是能分开的,只是需要多试试而已!要有耐心哟!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

gwmgyp
3楼2016-04-24 13:42:29
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lainaxior414

金虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by gwmgyp at 2016-04-24 13:42:29
通过筛选缓冲盐溶液种类及不同的PH值,并优化梯度洗脱模式,用一般的反相柱是能分开的,只是需要多试试而已!要有耐心哟!

哈哈哈~~谢谢老师的回复!!^_^

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4楼2016-04-24 13:44:03
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liukuo1

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你确定柱温和原文献是一样的么?
5楼2016-04-25 11:18:14
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lainaxior414

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liukuo1 at 2016-04-25 11:18:14
你确定柱温和原文献是一样的么?

哎呀!!多谢提点!我确实没控制柱温,不知道影响会不会很大,应该会有影响的吧!谢谢建议!!!

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6楼2016-04-25 19:57:27
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窗外的天空26

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gwmgyp at 2016-04-24 13:42:29
通过筛选缓冲盐溶液种类及不同的PH值,并优化梯度洗脱模式,用一般的反相柱是能分开的,只是需要多试试而已!要有耐心哟!

反向柱子可以加盐吗

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微笑生活
7楼2018-01-26 02:05:29
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瑜瑾小卧龙

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

8楼2018-01-26 22:57:28
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Nevermore_、

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lainaxior414 at 2016-04-25 19:57:27
哎呀!!多谢提点!我确实没控制柱温,不知道影响会不会很大,应该会有影响的吧!谢谢建议!!!
...

梯度洗脱,柱温影响很小的。

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9楼2018-01-27 12:56:59
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