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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 两种同分异构体用HPLC不能分离，如何改变流动相？
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lainaxior414

金虫 (正式写手)

[求助] 两种同分异构体用HPLC不能分离，如何改变流动相？ 已有3人参与

最近在做百里香酚和香芹酚的HPLC，流动相文献上说是甲醇：水：冰醋酸（60:40:2），两个都会出峰。但我实际单独做两个对照品时，一个是18.9min出峰，一个是19.9min出峰，用样品做两种物质却不能分离，19~20min只出现一个峰，请问各位流动相该如何改变？

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1楼 2016-04-24 11:23:35
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上海波粒

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
调整有机比例，调整洗脱能力，改变色谱柱保留能力，这两个物质保留值太近了，要去不停的试
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2楼2016-04-24 12:33:39
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
通过筛选缓冲盐溶液种类及不同的PH值，并优化梯度洗脱模式，用一般的反相柱是能分开的，只是需要多试试而已！要有耐心哟！
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lainaxior414
gwmgyp
3楼2016-04-24 13:42:29
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lainaxior414

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by gwmgyp at 2016-04-24 13:42:29
通过筛选缓冲盐溶液种类及不同的PH值，并优化梯度洗脱模式，用一般的反相柱是能分开的，只是需要多试试而已！要有耐心哟！

哈哈哈~~谢谢老师的回复！！^_^

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4楼2016-04-24 13:44:03
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liukuo1

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你确定柱温和原文献是一样的么？
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5楼2016-04-25 11:18:14
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lainaxior414

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liukuo1 at 2016-04-25 11:18:14
你确定柱温和原文献是一样的么？

哎呀！！多谢提点！我确实没控制柱温，不知道影响会不会很大，应该会有影响的吧！谢谢建议！！！

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6楼2016-04-25 19:57:27
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窗外的天空26

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gwmgyp at 2016-04-24 13:42:29
通过筛选缓冲盐溶液种类及不同的PH值，并优化梯度洗脱模式，用一般的反相柱是能分开的，只是需要多试试而已！要有耐心哟！

反向柱子可以加盐吗

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微笑生活
7楼2018-01-26 02:05:29
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瑜瑾小卧龙

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2018-01-26 22:57:28
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Nevermore_、

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lainaxior414 at 2016-04-25 19:57:27
哎呀！！多谢提点！我确实没控制柱温，不知道影响会不会很大，应该会有影响的吧！谢谢建议！！！
...

梯度洗脱，柱温影响很小的。

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9楼2018-01-27 12:56:59
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