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CLMMS

新虫 (初入文坛)

[求助] 胶原蛋白电泳 已有1人参与

最近在做胶原蛋白电泳，测了四个样，其中有sigma买的一型胶原蛋白，还有市售的鱼皮胶原，猪皮胶原，同时还有我们实验室自己提的兔皮胶原。除了自己提的兔皮的其他的都跑不出来，连sigma的都跑不出来。样品前处理试了很多方法，买的那些胶原都是粉末的，溶在水里面看不出来是不是溶了，发白的水一样。而自己提的胶原冻干后是海绵状的溶解之后溶液粘稠。我在想是不是因为粉末状的太难溶了，所以跑不出来呢？再跑电泳之前我该测了蛋白浓度，可以测出来，而且买的要比自己提的蛋白浓度还高一些，求大神分析！

@是水货 @lovibond @xiaoamuchong @shenyingbin @cgjlove @sugz @幸福的柴门 @hackfeng0 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-04-22 23:31:17
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meizhou

木虫 (知名作家)

沉墨于心，不没于物
看看文献吧，我们课题组研一的学生跑得也很好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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《memory》---BarbaraStreisand
2楼2016-04-28 01:13:44
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CLMMS

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by meizhou at 2016-04-28 01:13:44
看看文献吧，我们课题组研一的学生跑得也很好

请问他们是怎么前处理的呢？按照文献上面的做也是跑不出哇！

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3楼2016-04-28 09:06:48
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muziyu1024

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1、胶原蛋白首先要溶解了才能跑电泳，有活性的胶原蛋白是不会溶解于水的，你可以加一点醋酸，浓度不能太大。
2、你还要确认你买的胶原蛋白的分子量是多少？医用的胶原蛋白都应该是大分子的胶原蛋白，分子量30KDa。一般市售的鱼皮胶原是用来吃或美容的，是胶原多肽，分子量一般只有几千。这两种不同的胶原是不能放在一起跑的。
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4楼2016-07-21 10:58:09
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CLMMS

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by muziyu1024 at 2016-07-21 10:58:09
1、胶原蛋白首先要溶解了才能跑电泳，有活性的胶原蛋白是不会溶解于水的，你可以加一点醋酸，浓度不能太大。
2、你还要确认你买的胶原蛋白的分子量是多少？医用的胶原蛋白都应该是大分子的胶原蛋白，分子量30KDa。 ...

我买的是牛皮的大分子胶原蛋白，分子量大概30K，经过很多次不同方法的尝试，可以跑出来了，是加了LDS和二硫苏糖醇以后煮沸5min处理的。只是条带有些奇怪，不像是一型胶原，我买的是一型的哇，没搞懂怎么回事。

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5楼2016-07-21 23:54:15
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CLMMS

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by muziyu1024 at 2016-07-21 10:58:09
1、胶原蛋白首先要溶解了才能跑电泳，有活性的胶原蛋白是不会溶解于水的，你可以加一点醋酸，浓度不能太大。
2、你还要确认你买的胶原蛋白的分子量是多少？医用的胶原蛋白都应该是大分子的胶原蛋白，分子量30KDa。 ...

谢谢您的帮助

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6楼2016-07-21 23:55:21
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