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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助，已知一段800bp左右的核苷酸序列，如何设计引物
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十五进制

木虫 (正式写手)
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7楼: Originally posted by Miscanthus at 2016-04-22 21:44:08
扩增完干嘛用？只要800根据两端序列直接设计就对了，模板是载体很好办，模板是基因组要考虑同源序列。good luck

没有模板，扩曾完要和另一段再连，最后肯定是要往载体上连，但是还需要连好几段呢，我需要没有模板得到它。

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11楼2016-04-22 23:58:38
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十五进制

木虫 (正式写手)
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9楼: Originally posted by biozhajie at 2016-04-22 21:51:57
那心须要在这段序列以外的上下游分别设计引物 再考虑须扣除的测序时起始阶段的杂峰区片段 估计扩增片段至少要1000多

没有模板，扩曾完要和另一段再连，最后肯定是要往载体上连，但是还需要连好几段呢，我需要没有模板得到它。

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12楼2016-04-22 23:59:26
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十五进制

木虫 (正式写手)
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3楼: Originally posted by stone2239 at 2016-04-22 18:16:17
800bp又不大，直接设计引物扩就行。

没有模板，扩曾完要和另一段再连，最后肯定是要往载体上连，但是还需要连好几段呢，我需要没有模板得到它。

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13楼2016-04-23 00:00:10
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十五进制

木虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-22 19:38:18
800bp引物的设计还是比较简单的，利用相关软件设计（primer 3.0）.
另外你是只有800想完全扩增这些序列，还是什么？

没有模板，完全扩增得到可行？扩曾完要和另一段再连，最后肯定是要往载体上连，但是还需要连好几段呢，我需要没有模板得到它。

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14楼2016-04-23 00:00:53
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jingyu90217

新虫 (小有名气)
没有模板还要这段序列的话 可以直接找公司做基因合成啊。然后还能帮你直接连到载体上。我们实验室有个学姐没有模版，就找的公司。

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15楼2016-04-23 00:37:01
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接基因合成吧，合成时可以留下合适酶切位点，方便后续和其他片段连接。

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
16楼2016-04-23 06:49:09
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biozhajie

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 十五进制 at 2016-04-22 23:59:26
没有模板，扩曾完要和另一段再连，最后肯定是要往载体上连，但是还需要连好几段呢，我需要没有模板得到它。
...

啥意思 能说得通俗点吗

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17楼2016-04-23 10:23:31
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轩辕氏

银虫 (初入文坛)
有一个在线的引物设计网站primer puls 3

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缘到即来，缘走即散。
18楼2016-04-23 14:19:20
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z631535213

木虫 (正式写手)
没模版你怎么扩增

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19楼2016-04-24 07:17:44
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十五进制

木虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by biozhajie at 2016-04-23 10:23:31
啥意思 能说得通俗点吗
...

正反引物互为模板
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20楼2016-04-24 12:35:26
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