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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 被噬菌体侵染的大肠杆菌工程菌株可以分离出不含噬菌体的单菌落吗？
汕头大学海洋科学接受调剂
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城默study

金虫 (初入文坛)

[求助] 被噬菌体侵染的大肠杆菌工程菌株可以分离出不含噬菌体的单菌落吗？ 已有1人参与

实验室出现一种噬菌体，噬菌斑实验显示BL21，JM109，k-12系列菌株均可以被侵染，但我们的有几株k-12系列工程菌株是基因敲除过的（10个基因被敲除），这些菌株花了大量的时间去构建，不舍得直接扔掉，想请问各位大神怎样才能分离出不含噬菌体的工程菌株，感激不尽！
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1楼 2016-04-22 09:48:45
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hql198903

金虫 (小有名气)
不知道
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2楼2016-04-22 15:46:38
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城默study

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hql198903 at 2016-04-22 15:46:38
不知道

3楼2016-04-22 17:23:44
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
没有办法

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4楼2016-04-22 18:39:43
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deitygl

银虫 (初入文坛)
你说不含噬菌体的工程菌，意思是你们这是溶源性噬菌体，还是说你要抗噬菌体的工程菌？如果确定是溶原性噬菌体，貌似只能把你的菌丢掉。噬菌体抗性菌株不容易获得，也不稳定，病毒的变异能力绝对快过你的筛选。最好换一批感受态，再就是工作环境的处理，这个很重要

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5楼2016-04-22 20:31:15
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城默study

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by deitygl at 2016-04-22 20:31:15
你说不含噬菌体的工程菌，意思是你们这是溶源性噬菌体，还是说你要抗噬菌体的工程菌？如果确定是溶原性噬菌体，貌似只能把你的菌丢掉。噬菌体抗性菌株不容易获得，也不稳定，病毒的变异能力绝对快过你的筛选。最好换 ...

我们实验室的这个噬菌体在前期不爆发，等菌长到一定阶段的时候就爆发（罐上），菌体OD急速下降，不知道是不是溶原性噬菌体。如果不是溶原性噬菌体可以筛选出来吗？我的意思是，不是每个细胞里都有噬菌体吧，那么可不可以通过多次稀释涂布筛出不含噬菌体的单菌落？
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6楼2016-04-23 16:39:42
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城默study

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ganchao1776 at 2016-04-22 18:39:43
没有办法

谢谢
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7楼2016-04-23 16:40:06
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ccandcc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这些菌都应该扔了。

你们原来的质粒应该还有吧，从新导进去不就可以了吗 ，花不了多久时间的。
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8楼2016-04-25 13:57:45
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bigboy2050

铜虫 (小有名气)
保存的原始菌株也染了吗？还是有可能分离出未被侵染的细胞，但概率较小。

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职业无分贵贱，做事要有格调
9楼2016-04-25 19:22:35
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