| 查看: 77 | 回复: 0 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
playboy723金虫 (正式写手)
|
[交流]
请教关于包涵体酶切的问题
|
||
|
各位虫友好：我用pet-32a纯化出几个蛋白，但遇到了几个问题，望高手不吝赐教 谢谢了 首先是我需要用肠激酶切掉载体上的额外表达的蛋白， 但由于我的目的蛋白可能对菌体有毒副作用 所以目的蛋白基本都以包涵体的形式存在（我修改过诱导条件，没有用的），我用6M盐酸胍纯化出目的蛋白后发现肠激酶好像切不开 所以是否盐酸胍对肠激酶有抑制作用呢？如果有的话我该怎么解决呢 这些额外蛋白必须得切掉的 否则影响蛋白功能。 其次我想请问一下大家用咪唑洗脱下的目的蛋白能不能直接用于下游的细胞和动物试验呢？因为我不确信咪唑对细胞或者蛋白的功能有没有不利的影响，大家有做过的吗 或者说是正确的做法是怎样的，我以前没做过这些 而且周围也没有师兄师姐做过这个 希望大家不吝赐教。 最好是有一个完整的protocol 我愿高价求得 呵呵 |
回复此楼» 猜你喜欢
存款400万可以在学校里躺平吗
已经有25人回复
-
拟解决的关键科学问题还要不要写
已经有8人回复
-
最失望的一年
已经有7人回复
-
推荐一本书
已经有16人回复
-
国自然申请面上模板最新2026版出了吗？
已经有20人回复
-
26申博
已经有3人回复
-
请教限项目规定
已经有3人回复
-
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有10人回复
-
基金申报
已经有6人回复
-
疑惑？
已经有5人回复