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玄玄子

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 敲除基因,mtt观察对细胞增殖的影响

关于MTT实验,我看很多人做的是测试不同药物浓度的抑制率的。我做的是肿瘤细胞中,敲除其某基因后观测对其增殖的影响。96孔板,每孔5000细胞。我想问问大家,1.96孔板加细胞体积多少合适?(100ulor200ul,测4-5天)我现在是加100ul,我担心的是后期细胞培养基供给不足的问题;2.我做了几次,实验组和对照组细胞在0h(实际上加细胞后培养2h加mtt)的数量总是不一致,比如说,吸光值实验组0.2400.对照组只有0.2000左右,请问这个影响大不大?有什么方法可以消除这种起始不一致的误差吗?望有经验的朋友伸出援手!!!
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