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xiaochen9002

新虫 (小有名气)

[求助] RNA 反转录 不成功, 求助各位 已有1人参与

首先本人非新手,做过很多次。我从植物叶片中提取RNA后反转录,目的是做荧光定量PCR。但是目前存在的问题是提取的RNA质量不错,就是反转不出来c-DNA了。
首先, 新鲜叶片提取的RNA反转录成功(附图1,2中的编号为1,2),但是样品的RNA(编号为3)无扩增。怀疑是蛋白污染太严重,OD260/280为1.57,所以用氯仿再次抽提,同时提取了两个样品的RNA,附图3中的3,A, B。3的RNA降解严重,但是却反转成功,另外两个新提的RNA却没有反转成功。
不知道具体啥原因导致的,都要气死了,请各位大牛帮忙想想主意,非常感谢!!!!!!

RNA  反转录 不成功, 求助各位
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RNA  反转录 不成功, 求助各位-1
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RNA  反转录 不成功, 求助各位-3
4.jpg@biostar2009
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先你确定图3的3号样品是讲解了吗?是否是因为上样量比较少的原因啊?还有一个问题就是你自己之前提取了叶片中的RNA有做过RT-PCR吗?
坚持到底就是胜利!
2楼2016-04-21 22:12:51
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