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苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)


[交流] 最近每次PCR完都发现体积减少了很多,这是什么原因?

25ul的体系要少个将近10ul,PCR仪的盖子每次我都要检查一下,难道真是国产PCR管的原因吗
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苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)


还有就是体积少了这么多会不会对扩增结果有影响呢?
2楼2016-04-19 11:37:08
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)


石蜡油是最早的解决方案,不过不能用于Q-PCR

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13楼2016-04-19 12:21:05
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straylamb

铁杆木虫 (小有名气)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
盖子没有盖紧,试下换离心管!

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5楼2016-04-19 11:53:18
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
来一滴液体石蜡封盖,保证不少,独门绝学!
7楼2016-04-19 12:01:30
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
管子不够好,热盖的效果都有可能。热盖也有两种,恒温110摄氏度热盖,和变温热盖(高20多度)

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12楼2016-04-19 12:20:20
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苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)


引用回帖:
12楼: Originally posted by 山舞银蛇 at 2016-04-19 12:20:20
管子不够好,热盖的效果都有可能。热盖也有两种,恒温110摄氏度热盖,和变温热盖(高20多度)

那请问少这么多会对反应产生影响吗

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17楼2016-04-19 12:54:58
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971731043

新虫 (职业作家)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
18楼2016-04-19 13:03:01
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tbsjxy

铜虫 (小有名气)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
我也遇到过,换个好点的PCR管,就没事了
24楼2016-04-19 13:40:59
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苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)


引用回帖:
24楼: Originally posted by tbsjxy at 2016-04-19 13:40:59
我也遇到过,换个好点的PCR管,就没事了

请问你碰到这种情况结果是不是不太好

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26楼2016-04-19 13:47:13
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tbsjxy

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
26楼: Originally posted by 苯丙氨酸-PAL at 2016-04-19 13:47:13
请问你碰到这种情况结果是不是不太好
...

还可以,一样能出目的条带啊
27楼2016-04-19 13:48:15
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
盖子不是有热盖功能么?盖子是不是没有旋紧?实在不行,加1ul矿物油或石蜡油防止挥发。

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31楼2016-04-19 14:36:44
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任少峰

新虫 (小有名气)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
蒸发了嘛,加点石蜡油

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32楼2016-04-19 14:41:31
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)


引用回帖:
17楼: Originally posted by 苯丙氨酸-PAL at 2016-04-19 12:54:58
那请问少这么多会对反应产生影响吗
...

有影响,而且较大

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33楼2016-04-19 18:53:02
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8023xz

铁杆木虫 (文坛精英)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
盖子有问题吗?

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34楼2016-04-19 22:18:55
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Lily丶

铁虫 (小有名气)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
蒸发了!盖子不紧

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35楼2016-04-19 22:37:25
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
蒸发了,但是你蒸发的有点多呀

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36楼2016-04-19 23:02:31
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你太善良

新虫 (著名写手)



苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
专业术语,热盖。三种情况。pcr仪没这个功能,概率很小。设置问题,第三个最有可能,机器盖子没有弄紧,仅供参考。

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37楼2016-04-20 00:13:56
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魔理沙中尉

铜虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
拿出来以后用离心机离一离,往往是你没预热造成水汽附着于上壁的原因
38楼2016-04-21 20:38:32
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Liumengya

木虫 (正式写手)


39楼2016-04-22 22:54:25
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zoe回望

铁杆木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我用的是50的体系,感觉P完没有少啊,除非有次我盖子没盖好

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40楼2016-04-22 23:21:29
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maiduo

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
pcr仪顶板(盖子)温度设置105℃左右,会好很多  这样的话 pcr加热过程 盖子比底部温度高 液体就不会蒸发了 换一句话说  找个好点的pcrpcr仪试试

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41楼2016-04-23 00:32:50
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jingyu90217

新虫 (小有名气)


改用凸盖的pcr管,比平盖蒸发少。然后PCR仪盖子一定检查是否拧紧。

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42楼2016-04-23 00:44:55
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zxp海东青

新虫 (初入文坛)


43楼2016-04-23 06:38:14
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段李晓彤

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有一次我的1ul没剩,哈哈

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44楼2016-04-23 06:46:47
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简单回复
2016-04-19 11:42   回复  
苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
2016-04-19 11:49   回复  
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2016-04-19 11:59   回复  
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2016-04-19 12:05   回复  
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xhmaohan9楼
2016-04-19 12:06   回复  
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ieem11楼
2016-04-19 12:14   回复  
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billie11314楼
2016-04-19 12:22   回复  
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gengxin6015楼
2016-04-19 12:34   回复  
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zx2003297416楼
2016-04-19 12:40   回复  
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tan91419楼
2016-04-19 13:15   回复  
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hydzp20楼
2016-04-19 13:17   回复  
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a
2016-04-19 13:30   回复  
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by自律22楼
2016-04-19 13:35   回复  
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yy
2016-04-19 13:37   回复  
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2016-04-19 13:45   回复  
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78105570728楼
2016-04-19 13:48   回复  
苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
tzynew29楼
2016-04-19 13:52   回复  
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ZloveA30楼
2016-04-19 14:07   回复  
苯丙氨酸-PAL(金币+1): 谢谢参与
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