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幸运fly

银虫 (小有名气)

[求助] 多酚物质的提取分离和鉴定 已有2人参与

想向强大的虫友们请教下,有关多酚的提取分离的问题。我想检测一果汁中的多酚成分,然后做其生物活性。成分那么多,我该怎样用最佳的方式提取出大部分多酚成分呢?首先是提取溶剂的选择,然后萃取有必要石油醚,三氯甲烷,乙酸乙酯,正丁醇都用吗?还有其中糖比较多,该怎么出去?怎么进行纯化?看到文献有用大孔树脂。还需要再过各种柱子吗?用标准品做对照能确定是同一种物质吗?需要再做质谱和核磁吗?如果做核磁的话,我的样品需要怎么纯化才能符合要求?做核磁必须要求样品只含有一种单体还是几种也可以?(原谅我基础知识有点差,会努力补回来),最后就是做活性时,能保证我的样品中只含有多酚类物质吗?问题有点多,迷茫中,还望虫友大神们不吝赐教,灰常感谢,此处鞠躬三下。

@lifeliuyan 发自小木虫Android客户端
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燕儿南飞~

新虫 (小有名气)

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你的目的到底是分离得单体呢还是快速检测呢?快速检测多酚的话大孔树脂或者聚酰胺填料都有较好的富集效果,然后用标准品比对还是有说服力的,质谱分析能鉴定出更多成分的话更好,核磁就没必要了吧?
海纳百川
2楼2016-04-18 09:31:01
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fbj000

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3楼2016-04-18 09:38:54
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幸运fly

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fbj000 at 2016-04-18 09:38:54
1.多酚类化合物大部分都是水溶性的,极性都比较大,提取的话直接用80%的乙醇水就可以了
2.多酚类化合物极性都比较大,极性范围中等偏大,如果你做的是总多酚,建议用大孔树脂,对多酚的吸附效果还是很好的。
3.聚 ...

太谢谢了,很是受用,我主要是想检测果汁中含有哪几种酚酸和黄酮类物质,看文献中已有对该水果中的黄酮和酚酸,就先买了一些标准品,80%超声提取,浓缩后进的HPLC(感觉里面有很多糖,粘稠),发现峰很杂,可能梯度调的不好,有些峰分不开,而且有些峰太大,低的峰就不好显示了。因为我后面要分析这些多酚的生物活性,就想粗提物成分太多,显示活性作用不一定就是多酚的作用,分单体的话感觉工作量挺大的,也不一定分出来,所以一直不知道怎么设计实验。

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4楼2016-04-18 13:41:49
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幸运fly

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 幸运fly at 2016-04-18 13:41:49
太谢谢了,很是受用,我主要是想检测果汁中含有哪几种酚酸和黄酮类物质,看文献中已有对该水果中的黄酮和酚酸,就先买了一些标准品,80%超声提取,浓缩后进的HPLC(感觉里面有很多糖,粘稠),发现峰很杂,可能梯度 ...

已上写的有点小错误,我分别用无水乙醇、乙酸乙酯,丙酮都试着提取了一下,因为果汁本来就是水提的,使用含有水的有机溶剂不分层。

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5楼2016-04-18 13:47:56
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幸运fly

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 燕儿南飞~ at 2016-04-18 09:31:01
你的目的到底是分离得单体呢还是快速检测呢?快速检测多酚的话大孔树脂或者聚酰胺填料都有较好的富集效果,然后用标准品比对还是有说服力的,质谱分析能鉴定出更多成分的话更好,核磁就没必要了吧?

谢谢,不过买的标准品只是在文献中看到的,不可能都买来对照吧,做质谱的话也只能得到分子量吧,具体是什么也不好解吧

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6楼2016-04-18 13:56:56
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燕儿南飞~

新虫 (小有名气)

对照品对上了,其他母核相同的也可以解析了呀,质谱根据二级碎片是可以解析结构的呀

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海纳百川
7楼2016-04-18 16:43:02
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fbj000

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引用回帖:
6楼: Originally posted by 幸运fly at 2016-04-18 13:56:56
谢谢,不过买的标准品只是在文献中看到的,不可能都买来对照吧,做质谱的话也只能得到分子量吧,具体是什么也不好解吧
...

用高分辨质谱,利用它的二级碎片离子是可以解析的!
8楼2016-04-18 16:50:52
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