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张文波z

木虫 (正式写手)

新农人

[求助] 液相制备脂肽 已有3人参与

跪求大神赐教,我用的是C18半制备柱,流速3,甲醇梯度洗脱,试了好多比例都不行,乙腈也不理想,大家都是怎么纯化5个氨基酸左右的小肽的!

液相制备脂肽


液相制备脂肽-1


@lifeliuyan 发自小木虫Android客户端
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道虽迩不行不至,事虽小不为不成。
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wangjin1981

金虫 (正式写手)

念念不忘,必有回响

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张文波z: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-04-18 15:03:39
这个主要看序列,如果极性很大,乙腈的起始浓度需要很低,防止5肽被冲出来。
通常5肽是没有问题的,调整你的梯度

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

to be or not to be
2楼2016-04-18 10:50:42
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h88sandy

银虫 (小有名气)

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★ ★
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张文波z: 金币+2, 有帮助 2016-04-18 15:04:01
跟梯度,PH值,流速都有关系!
3楼2016-04-18 11:06:37
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h88sandy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by h88sandy at 2016-04-18 11:06:37
跟梯度,PH值,流速都有关系!

补充下:还要调整流动相
4楼2016-04-18 11:07:04
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上海波粒

铜虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张文波z: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-04-18 15:04:15
C18选择很重要,不是所有C18都适合做制备的,也不是所有C18适合做多肽的,分不开,就降低有机比例吧,加强保留,才有希望分开,制备可以考虑OL Apple C18-EX
5楼2016-04-18 11:36:37
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张文波z

木虫 (正式写手)

新农人

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引用回帖:
2楼: Originally posted by wangjin1981 at 2016-04-18 10:50:42
这个主要看序列,如果极性很大,乙腈的起始浓度需要很低,防止5肽被冲出来。
通常5肽是没有问题的,调整你的梯度

大家通常都用乙腈吗?我用的是0.1%的甲酸,是不是,三氟乙酸更好啊?

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道虽迩不行不至,事虽小不为不成。
6楼2016-04-18 14:54:38
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wangjin1981

金虫 (正式写手)

念念不忘,必有回响

引用回帖:
6楼: Originally posted by 张文波z at 2016-04-18 14:54:38
大家通常都用乙腈吗?我用的是0.1%的甲酸,是不是,三氟乙酸更好啊?
...

嗯,都是乙腈,只有大规模制备考虑洗脱剂成本时,才会选用甲醇作为洗脱剂。三氟乙酸应该是被选做缓冲盐最多的
to be or not to be
7楼2016-04-18 16:33:30
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