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293F 瞬转生产出的抗体纯化后内毒素超标
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| 最近，我们瞬转出的抗体纯化后内毒素超标，细胞没有污染，现在公司里的人怀疑是质粒的内毒素超标才导致的，所以在查质粒的内毒素，可是我有个疑问，内毒素不就是革兰氏阴性细菌细胞壁的脂多糖吗！就算质粒内毒素超标，不也就只有一点点吗，这会影响后续抗体的内毒素吗？如果不是这个原因的话，那又是什么原因呢？ |
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雷虫木磊: 金币+3, 不错 2016-04-20 06:54:05
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雷虫木磊: 金币+3, 不错 2016-04-20 06:54:05
| 支持楼上说的，一般来说哺乳动物是没有内毒素的，原核内毒素有，但是如果不影响下游应用，也不需要去除，你的这个内毒素如果超标，细胞就长不起来，所以到纯化的时候，和原核一样，控制整个试剂器皿等无菌，哺乳动物本身就是无菌操作，内毒素去除检测：http://www.detaibio.com/topics/edotoxin-removal-protocol-faq.html |
5楼2016-04-19 18:43:40
小周
铁杆木虫 (著名写手)
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雷虫木磊: 金币+1 2016-04-19 06:40:54
雷虫木磊: 金币+1 2016-04-19 06:41:08
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雷虫木磊: 金币+1 2016-04-19 06:40:54
雷虫木磊: 金币+1 2016-04-19 06:41:08
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当然是纯化的问题了。如果质粒内毒素超这么多，细胞首先就长不起来。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-04-18 05:58:43
4楼2016-04-19 06:40:56