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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 一直出现拖尾，没有带
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-14 17:20:43
检测结果是否有一条较大的带？如果还有较多小带的话扩增就会出现这现象。...

就一条dna应有的带，师姐说做Pcr没问题，之前做的好好的，现在就是做不出来

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11楼2016-04-14 17:23:27
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2013101102

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 1135482512 at 2016-04-14 17:07:51
模板我检测了，还可以，
...

更换缓冲液试试，或者检测下PCR仪是不是有问题还是扩增程序被修改了。
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,越努力越幸运。
12楼2016-04-14 19:26:28
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 2013101102 at 2016-04-14 19:26:28
更换缓冲液试试，或者检测下PCR仪是不是有问题还是扩增程序被修改了。...

缓冲液别人也用，没问题，程序也是之前能做出来的程序。

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13楼2016-04-14 19:38:42
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zliean

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1135482512: 金币+2 2016-04-14 23:19:03
酶有没有问题呢 更换酶 做个剃度pcr试一试

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14楼2016-04-14 22:58:36
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zliean at 2016-04-14 22:58:36
酶有没有问题呢 更换酶 做个剃度pcr试一试

用的是mix，梯度我也做过，也是这样

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15楼2016-04-14 23:18:50
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zliean

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by 1135482512 at 2016-04-14 23:18:50
用的是mix，梯度我也做过，也是这样
...

做的菌液还是质粒

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16楼2016-04-14 23:21:13
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by zliean at 2016-04-14 23:21:13
做的菌液还是质粒
...

做的大豆，之前根本没出现这种情况

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17楼2016-04-15 06:58:14
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20092290

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1135482512: 金币+3 2016-04-15 11:19:50
首先，MARKER 没问题，不是电泳和焦的问题，换loadingbuffer试试，PCR一般不容易出现问题。
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18楼2016-04-15 11:17:52
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 20092290 at 2016-04-15 11:17:52
首先，MARKER 没问题，不是电泳和焦的问题，换loadingbuffer试试，PCR一般不容易出现问题。

PcR mix带染料的

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19楼2016-04-15 11:19:37
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smilyhr

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1135482512: 金币+3 2016-04-15 15:03:54
marker的条带还好，应该不是胶的问题。剩下就是pcr体系和pcr过程的问题，可以做一个别的基因的对照，如果对照做出来了说明不是pcr过程的问题，再设计对照实验证实一下pcr体系里面哪个组份的问题，感觉有点像是模板的问题，不过还是要用对照来证明
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20楼2016-04-15 14:22:34
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