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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » LPS刺激RAW264.7细胞，诱导不出炎症模型，求大神解答下！！！
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yjhuan

银虫 (小有名气)

[求助] LPS刺激RAW264.7细胞，诱导不出炎症模型，求大神解答下！！！ 已有3人参与

试过用100ng/ml,300ng/ml,1ug/ml刺激6h,12h,24h.均检测不到细胞培养液上清中IL-6,TNF-a,IL-1b因子变化，后来又降低了培养液中血清的浓度，也试着用我们学院其他实验室的RAW264.7细胞进行实验，均未检测出变化，哪位大神做出来过给指教下，不胜感激！
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1楼 2016-04-11 14:41:51
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pympympym219

新虫 (初入文坛)
内容已删除
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8楼2016-06-03 14:16:52
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沐晴儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yjhuan at 2016-04-12 19:21:42
谢谢哦，你有做过LPS刺激巨噬细胞的实验么？...

我现在在做，请问你现在还做嘛？

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15楼2017-07-28 20:56:37
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普通回帖

蜂鸟404

铁杆木虫 (正式写手)
IL-1b在上清是检不到的要收集细胞破碎才能收集到，TNF我用刺激4小时就可以检测到而且还要稀释10倍，你看看是不是你的lps不行了，换个试试

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2楼2016-04-11 14:51:25
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yjhuan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 蜂鸟404 at 2016-04-11 14:51:25
IL-1b在上清是检不到的要收集细胞破碎才能收集到，TNF我用刺激4小时就可以检测到而且还要稀释10倍，你看看是不是你的lps不行了，换个试试

谢谢，那请问下你用的哪个公司的LPS？能提供下货号么  谢谢
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3楼2016-04-11 15:31:37
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蜂鸟404

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yjhuan at 2016-04-11 15:31:37
谢谢，那请问下你用的哪个公司的LPS？能提供下货号么  谢谢...

sigma

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4楼2016-04-11 16:57:51
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qwbio123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
sigma的挺贵的，建议自己提取lps，方法挺简单的，可以买个lps提取试剂盒就OK了。详情请点击http://www.bioconsumable.com/cn/ ... 447480300770271.htm
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5楼2016-04-12 16:33:15
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yjhuan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by qwbio123 at 2016-04-12 16:33:15
sigma的挺贵的，建议自己提取lps，方法挺简单的，可以买个lps提取试剂盒就OK了。详情请点击http://www.bioconsumable.com/cn/br/Kits/07/Kits6447480300770271.htm

谢谢哦，你有做过LPS刺激巨噬细胞的实验么？
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6楼2016-04-12 19:21:42
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Wen-X

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我LPS用的是100ng/ml。但是之前测NO结果很好，然后买了其他的试剂盒，但是不知道怎么搞的细胞好像有抗药性了一样，没有显著差异，连阳性药都没啥效果了……细胞边缘是有少量分化的，但之前也这样没什么影响，完全不知道该怎么办了，顺便求指教！！！
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7楼2016-05-01 14:52:41
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庸人——自扰

银虫 (初入文坛)
你好，我最近在做LPS诱导炎症模型，用NO试剂盒检测空白组和诱导组无明显差异，可以请教下你的诱导方法么？时间，浓度？谢谢！

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9楼2016-12-22 09:48:41
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魏书香

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 庸人——自扰 at 2016-12-22 09:48:41
你好，我最近在做LPS诱导炎症模型，用NO试剂盒检测空白组和诱导组无明显差异，可以请教下你的诱导方法么？时间，浓度？谢谢！

您好 您的lps诱导的炎性细胞模型现在做出来了吗，求助啊 啊谢谢
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10楼2016-12-29 13:44:12
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