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兰子兔

铁虫 (初入文坛)

[求助] 做蛋白结构的新手,请教TEV酶切问题~

今天老板,老板,老板。。。。。他。。。。他。。。他让我加tev酶过夜酶切蛋白,我那个蛋白浓度一个是5mg/ml左右,一个是10mg/ml左右,老板让我多的那个加了50微升6mg/ml的tev酶,少的那个加了25微升的tev酶。结果结果,老板娘告诉我蛋白沉淀了,这是什么鬼????
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mjliu1988

新虫 (初入文坛)

蛋白沉淀可能与蛋白自身性质有关,跟酶切没什么关系,可以做个对照,不加酶过夜看看什么情况。另外可以考虑一下酶切的条件,温度,ph等,还有蛋白浓度,太高了也容易析出。多考虑做几个对照,才能找到原因,祝你好运!

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为科学献身
2楼2016-04-10 09:56:01
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