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wangshumin55新虫 (小有名气)
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[求助]
有哪位虫友测过PG酶的酶活？请问Cbz-Gln-Gly与Z-Gln-Gly是同一个试剂吗？ 已有1人参与
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有哪位虫友测过谷氨酰胺酶（PG酶）的酶活？我查了一下，底物溶液需要二肽Cbz-Gln-Gly；请问Cbz-Gln-Gly与Z-Gln-Gly是同一个试剂吗？有没有哪位虫友知道具体该怎样测PG酶的酶活呢？底物又是在哪里买到的？请各位虫友给予指点，多谢啦 |
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windygo
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【答案】应助回帖
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不好意思，出去嗨了，才看到。 多聚半乳糖醛酸酶( PG)活性：Amnuaysin等（2012）和Figueroa等（2010）的方法。取2g样品，用6mL酶提取液( 6%NaCl，内含0.6%EDTA，1%PVP) 匀浆 然后再10000r/min离心20min，上清液即为粗酶提取液，待用。将酶提取液稀释10倍，取稀释液0.1 mL，加0.5%的果胶溶液( pH 4.0) 1.0 mL，对照为pH 4.0的醋酸缓冲液，37℃恒温反应30min后加入0.9 mL DNS试剂，沸水浴5 min，冷却，加水定容至15 mL，摇匀，540 nm波长处测吸光值 以D-( +) 半乳糖醛酸标准溶液作标准曲线，以每分钟每克鲜样37℃时分解果胶产生1 g的游离半乳糖醛酸为1个酶活力单位( U)。 |
4楼2016-04-09 21:28:46
windygo
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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我测过，但是不知道要用你提到的试剂。 不行就换个方法吧，我当时用的就挺简单的。 |
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wangshumin552楼2016-04-09 09:36:18
wangshumin55
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3楼2016-04-09 11:32:51
wangshumin55
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。。。不过还是非常感谢您5楼2016-04-10 14:30:42
50