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wangshumin55

新虫 (小有名气)

[求助] 有哪位虫友测过PG酶的酶活?请问Cbz-Gln-Gly与Z-Gln-Gly是同一个试剂吗?已有1人参与

有哪位虫友测过谷氨酰胺酶(PG酶)的酶活?我查了一下,底物溶液需要二肽Cbz-Gln-Gly;请问Cbz-Gln-Gly与Z-Gln-Gly是同一个试剂吗?有没有哪位虫友知道具体该怎样测PG酶的酶活呢?底物又是在哪里买到的?请各位虫友给予指点,多谢啦
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你输在总是选择容易走的路。。。
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windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by wangshumin55 at 2016-04-09 11:32:51
不知这位虫友用的什么方法呢?可否给提供具体的测定步骤呢,我也是找了好久,找到一篇是用二肽Cbz-Gln-Gly作为底物溶液,但是又查到那个底物是用来测定TG酶酶活性的,所以现在不确定那个方法对不对了,还请这位虫友 ...

不好意思,出去嗨了,才看到。
多聚半乳糖醛酸酶( PG)活性:Amnuaysin等(2012)和Figueroa等(2010)的方法。取2g样品,用6mL酶提取液( 6%NaCl,内含0.6%EDTA,1%PVP) 匀浆 然后再10000r/min离心20min,上清液即为粗酶提取液,待用。将酶提取液稀释10倍,取稀释液0.1 mL,加0.5%的果胶溶液( pH 4.0) 1.0 mL,对照为pH 4.0的醋酸缓冲液,37℃恒温反应30min后加入0.9 mL DNS试剂,沸水浴5 min,冷却,加水定容至15 mL,摇匀,540 nm波长处测吸光值 以D-( +) 半乳糖醛酸标准溶液作标准曲线,以每分钟每克鲜样37℃时分解果胶产生1 g的游离半乳糖醛酸为1个酶活力单位( U)。
我已经开始怀念那些人,那些事了~
4楼2016-04-09 21:28:46
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windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我测过,但是不知道要用你提到的试剂。
不行就换个方法吧,我当时用的就挺简单的。

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我已经开始怀念那些人,那些事了~
2楼2016-04-09 09:36:18
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wangshumin55

新虫 (小有名气)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by windygo at 2016-04-09 09:36:18
我测过,但是不知道要用你提到的试剂。
不行就换个方法吧,我当时用的就挺简单的。

不知这位虫友用的什么方法呢?可否给提供具体的测定步骤呢,我也是找了好久,找到一篇是用二肽Cbz-Gln-Gly作为底物溶液,但是又查到那个底物是用来测定TG酶酶活性的,所以现在不确定那个方法对不对了,还请这位虫友给予指点啊
你输在总是选择容易走的路。。。
3楼2016-04-09 11:32:51
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wangshumin55

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by windygo at 2016-04-09 21:28:46
不好意思,出去嗨了,才看到。
多聚半乳糖醛酸酶( PG)活性:Amnuaysin等(2012)和Figueroa等(2010)的方法。取2g样品,用6mL酶提取液( 6%NaCl,内含0.6%EDTA,1%PVP) 匀浆 然后再10000r/min离心20min,上清液即 ...

呃呃呃,咱们两个说的好像不是一个酶,我要测定的是蛋白质谷氨酰胺酶(简称PG酶)的酶活性。。。不过还是非常感谢您
你输在总是选择容易走的路。。。
5楼2016-04-10 14:30:42
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