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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 小分子偶联蛋白出现大量沉淀
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snk958980

铜虫 (初入文坛)

[求助] 小分子偶联蛋白出现大量沉淀 已有2人参与

最近做皂素分子偶联BSA制作小分子抗原。
    先是用琥珀酸酐法使皂素分子衍生出羧基，2ml DMF溶解9mg皂素衍生物后NHS/DCC法4℃过夜活化，离心除去多余的DCU沉淀。
    20mgBSA溶于2ml pH8.0 Na2CO3溶液。上述皂素分子溶液缓慢滴加入BSA液中就逐渐产生大量乳白色沉淀（应该是BSA沉淀了），导致偶联失败。
    麻烦有经验的同学帮忙解答一下，并给点建议，谢谢了。
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1楼 2016-04-08 00:38:23
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小馨月

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

是不是小分子有机溶剂太多
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3楼2016-07-05 21:51:21
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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.白色沉淀，不一定代表抗原合成就一定失败，我曾经就有颗粒抗原免疫效果很好的一次经验；
2.NHS/DCC法4℃过夜活化，有可能活化时间过长
3.可能的关键是20mgBSA溶于2ml pH8.0 Na2CO3溶液，溶解的 Na2CO3溶液离子强度或PH不对
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云山苍苍，江水泱泱，先生之风，山高水长
2楼2016-04-10 14:50:16
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