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rola234

新虫 (小有名气)

[求助] 加了信号肽的全长跨膜蛋白能分泌表达吗?

最近要发酵一个膜蛋白,因为糖基化位点比较多,而且二硫键也不少,因此准备用的是哺乳动物细胞CHO表达系统,我的膜蛋白是TNF受体家族的一个成员,胞外区不是很大,跨膜区也很小,大概只有23个氨基酸,有α螺旋的结构,属于三型跨膜蛋白,主要结构都在胞内区。我想发酵全长蛋白,用SingalP 4.1分析了一下氨基酸序列,发现并没有信号肽,因此加了一个20个氨基酸的信号肽序列上去,构建已经做完了。那么问题来了,如果没加信号肽的全长蛋白有可能卡在细胞膜上,那加了信号肽的全长蛋白有木有可能分泌表达啊?还是在出核的过程中也极有可能卡在细胞膜上?求教。。
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我可以走得很慢,但我不会后退!
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zjhsoda

新虫 (初入文坛)

请问楼主的实验结果怎么样了……我的蛋白好像跟你的有点相似,预测没有信号肽,有一个小跨膜螺旋。请问怎么看胞内区和胞外区啊,加什么样的信号肽啊……
2楼2018-10-10 16:48:15
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