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小鹿3姐

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by juliet6303 at 2016-04-07 16:19:23
A和C可以扩更长的片段

可是为什么B就只能朝3‘端呢,把双链反过来不是BC也一样了吗
11楼2016-04-07 18:00:13
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juliet6303

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by 小鹿3姐 at 2016-04-07 18:00:13
可是为什么B就只能朝3‘端呢,把双链反过来不是BC也一样了吗...

以下转自维基百科:
DNA链是具有方向性的,对于DNA的一条单链来说,它的两个末端分别被命名为“3'端”和“5'端”。DNA两条单链的结构之所以被描述为“反向平行双螺旋”,其中的“反向”即指两条单链中,一条链的方向是从3'端到5'端,而另一条则相反,是从5’端到3’端。5和3指的是在一个脱氧核糖中连接着相邻的磷酸基团的两个碳原子。方向性对于DNA合成有重要的意义,因为在DNA合成的过程中,DNA聚合酶只能向3'端的方向添加新的脱氧核糖核苷酸。

DNA中两条链的碱基是通过氢键连接实现一一配对的,这意味着一个DNA中的两条单链都包含着完全相同的信息。这样,一条单链中的核苷酸可以用来重建互补链中预期相对的核苷酸。

所以,回到你的问题,把B和C都反过来,可以做PCR,理论上也能扩增出片段,但是,序列是彻底反的,是反向不互补,还是方向性问题; 如果实在不想重新合成引物,PCR产物后续也不作其他实验的话,可以做,也可以测序,结果,反过来就是了。

不知你明白了没有,画个图看看就知道了
12楼2016-04-07 21:12:42
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Bioexperixgs

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不可以。如果模板足够长,直接用A 和C啊。如果是想做插入可以用overlap pcr。

发自小木虫Android客户端
13楼2016-04-08 11:45:02
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BBMC-2012

木虫 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
哥,不行啊,在设计一条上游引物

发自小木虫Android客户端
14楼2016-04-08 16:55:24
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