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汕头大学海洋科学接受调剂
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yeruge

新虫 (小有名气)

[交流] 基因敲出 已有9人参与

如何敲除一个微生物的两个片段?

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star013

新虫 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
现在比较流行的就是crisper啊,我们可以做

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2楼2016-04-07 08:11:57
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yeruge

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by star013 at 2016-04-07 08:11:57
现在比较流行的就是crisper啊,我们可以做

怎么弄的

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3楼2016-04-07 12:13:13
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star013

新虫 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
需要一套敲除系统

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4楼2016-04-07 13:13:36
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原海亮

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看是什么菌了,有的菌有现成的试剂盒,当然大部分敲除基因主要还是依赖于同源重组,遗传操作系统比较清晰的菌种都可以找到现成的敲除技术的Protocol,先了解一下敲除原理最好。

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
5楼2016-04-07 18:18:30
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yeruge

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-04-07 18:18:30
看是什么菌了,有的菌有现成的试剂盒,当然大部分敲除基因主要还是依赖于同源重组,遗传操作系统比较清晰的菌种都可以找到现成的敲除技术的Protocol,先了解一下敲除原理最好。
...

我的是乳酸菌,嗜酸乳杆菌

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6楼2016-04-07 21:32:56
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sibei1

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你说的是片段deletion吧

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时代遗孤
7楼2016-04-07 23:55:44
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sibei1

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果是两个位点的敲除,分别设计gRNA,选择效率高的,再流逝分选,单克隆,鉴定基因型,看是否移码突变

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时代遗孤
8楼2016-04-07 23:58:58
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sibei1

新虫 (小有名气)

时代遗孤
9楼2016-04-08 00:00:16
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wanghaiji

木虫 (著名写手)

科研家


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个需要利用同源重组的方法,先敲一个再敲另一个。

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Youcouldfailonehundredtimes,butyoumustwinthelast.
10楼2016-04-10 09:34:47
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