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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 电击转化大肠肝菌DH5a后时间显示0.8mS，意味着什么呢？
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧

[交流] 电击转化大肠肝菌DH5a后时间显示0.8mS，意味着什么呢？

刚才做了电击转化大肠肝菌，设置了5mS，可是结果显示实际时间是0.8mS，为什么会这么短呢？时间短了会不会对效率有影响呢？

谢谢！
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1楼 2008-10-22 18:44:17
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zhua666

金虫 (小有名气)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-3 09:48
样品离子强度高了，需要脱盐处理。否则电流强度太大，使绝大部分感受态细胞被打死，使转化率降低。
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2楼2008-10-23 08:58:39
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jasco

木虫 (正式写手)
一般打出来应该是4点几才对
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3楼2008-10-23 09:20:52
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧
今天数了一下克隆数为805个

看样子转化的效率还真是比较低
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4楼2008-10-23 09:42:31
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amberking

电压设多大，有时候过大也会缩短时间的
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5楼2008-10-23 14:34:51
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧
引用回帖:
Originally posted by amberking at 2008-10-23 14:34:
电压设多大，有时候过大也会缩短时间的

2.5KV
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6楼2008-10-23 15:45:41
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧
做了几次都是0.8mS 转化效率不高
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7楼2008-10-25 11:49:19
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amberking

电流强度太大，不能持续5ms的时间
但是以前我做过是0.8ms效果也还可以啊，不然电转化完后加LB液体培养基在摇床上恢复一个小时后再涂板子吧
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8楼2008-10-25 18:38:38
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧
引用回帖:
Originally posted by amberking at 2008-10-25 18:38:
电流强度太大，不能持续5ms的时间
但是以前我做过是0.8ms效果也还可以啊，不然电转化完后加LB液体培养基在摇床上恢复一个小时后再涂板子吧

不知道你是转化的什么质粒

我转化的是8kb-12kb的质粒，我现在希望转化的效率高一些

电击后立即加37度SOC培养基1ml，摇床培养1h后铺氨苄抗性平板
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9楼2008-10-25 19:38:04
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