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hharl

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助

哪位大侠知道如何回收PAGE胶中的DNA
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1楼 2008-10-22 11:38:05
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
TAkaRA 有专门的回收pgae胶试剂盒 也可以用普通的胶回收试剂盒回收 只需将你要的带切下来 100度熔化 后回收就可以了 有问题可以再问 我们正在这么做 回收的没有问题
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2楼2008-10-22 11:43:01
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hharl

铜虫 (初入文坛)

回复snzydong

100度加热，那DNA岂不是已经变性了吗
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3楼2008-10-22 12:02:56
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天涯海角

木虫 (著名写手)

害群之牛
很简单，用刀片把目的条带从page上切下来，放入ep管，加20ul ddh2o，煮沸十五分钟，去5-10ul作为模版，用原来的扩增引物和程序重新扩增就可以获得目的条带，然后作琼脂糖凝胶回收就ok！
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井底之蛙也可笑看天下
4楼2008-10-22 12:07:53
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天涯海角

木虫 (著名写手)

害群之牛
引用回帖:
Originally posted by hharl at 2008-10-22 12:02:
100度加热，那DNA岂不是已经变性了吗

放心吧，没问题的！
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井底之蛙也可笑看天下
5楼2008-10-22 12:08:22
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hharl

铜虫 (初入文坛)

感谢天涯海角

但各位虫友是否参照那些资料之类的
而且原来实验室师兄留下的方案是加1-2体积缓冲液捣碎37度温浴过夜各种离心
  现在找不到该方案的出处，自己做了一遍没带，所以向各位请教。
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6楼2008-10-22 12:15:23
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hharl

铜虫 (初入文坛)

谢谢

感谢各位支持
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7楼2008-10-22 12:18:34
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天涯海角

木虫 (著名写手)

害群之牛
引用回帖:
Originally posted by hharl at 2008-10-22 12:15:
但各位虫友是否参照那些资料之类的
而且原来实验室师兄留下的方案是加1-2体积缓冲液捣碎37度温浴过夜各种离心
  现在找不到该方案的出处，自己做了一遍没带，所以向各位请教。

我说的方法，再煮沸以前也要用枪头把其捣碎，放心 ，不会破毁其结构，目的是让dna从page上释放出来
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井底之蛙也可笑看天下
8楼2008-10-22 12:41:13
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