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关于双酶切
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求助:关于双酶切 最近在构建一个质粒,大小约为7500bp左右,可以用BamH1和Xba1来酶切的,双酶切切出来的条带应该有一条是6500bp,还有一条是1000bp的,可是现在电泳图谱上就只能看见6500bp的那条条带,而1000bp的那条却找不着,另外用BamH1和Xba1来单独酶切时也都能看到7500bp的条带,而且做该质粒的菌液PCR扩增时是能清楚的看到1000bp的条带的。 我试过先将构建的质粒用Xba1单独酶切后切胶回收用BamH1再酶切,也试过两者同时加入一个反应体系中双酶切(缓冲液是按照混合时的说明来的),但是最后都没有找到那个1000bp的条带。 很急啊, 请问各位牛人这是怎么回事啊?我该怎么解决呢?在此拜谢了! [ Last edited by zhaoxiag on 2008-10-21 at 23:04 ] |
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