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企鹅爱飞机

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 拟南芥问题 已有1人参与

本人将拟南芥种子用75% 的乙醇消毒1分钟;用50%次氯酸钠(50%无菌水:0.05%吐温80),震荡洗涤20分钟后加入无菌蒸馏水清洗3次;均匀铺于MS培养基上,4℃春化4d,放在光照培养箱(温度:21℃,湿度:70%,16h光照,8h黑暗)中培养,今天已经第三天了,没有什么变化(资料上说第1-2d生根,3-4d长出二片叶子),想求助一下什么原因?
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woshisth

金虫 (小有名气)

我一般用的2%的次氯酸钠15分钟,4度春化2天就好了。估计是你消毒消过了。

发自小木虫Android客户端
。。。
2楼2016-04-12 23:23:45
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企鹅爱飞机

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 萧吟风 at 2016-04-13 23:27:49
按照我们的体系。
无菌条件,以灭菌蒸馏水浸泡10-15分钟,使表皮吸水膨胀,以次氯酸钠浸泡杀菌,过程中可手动震荡灭菌容器。
春化24-48小时,保障苗齐苗壮。
培养7-10天,可到2-4片叶的可移栽苗龄。
...

好的,我试试,非常感谢
8楼2016-04-14 14:00:44
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普通回帖

企鹅爱飞机

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by woshisth at 2016-04-12 23:23:45
我一般用的2%的次氯酸钠15分钟,4度春化2天就好了。估计是你消毒消过了。

恩恩,我也觉得,没消毒的出了几株,我试试你的方法

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3楼2016-04-12 23:32:35
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萧吟风

木虫 (著名写手)

第一、灭菌过了,次氯酸钠3-5分就可以。

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4楼2016-04-13 08:24:18
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企鹅爱飞机

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 萧吟风 at 2016-04-13 08:24:18
第一、灭菌过了,次氯酸钠3-5分就可以。

第二第三呢

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5楼2016-04-13 18:43:16
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萧吟风

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 企鹅爱飞机 at 2016-04-13 18:43:16
第二第三呢
...

按照我们的体系。
无菌条件,以灭菌蒸馏水浸泡10-15分钟,使表皮吸水膨胀,以次氯酸钠浸泡杀菌,过程中可手动震荡灭菌容器。
春化24-48小时,保障苗齐苗壮。
培养7-10天,可到2-4片叶的可移栽苗龄。

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6楼2016-04-13 23:27:49
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我是小李飞刀

新虫 (小有名气)

我用70%乙醇灭菌十分钟,4℃放2-3天。应该是灭菌过了

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7楼2016-04-14 13:53:51
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企鹅爱飞机

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 我是小李飞刀 at 2016-04-14 13:53:51
我用70%乙醇灭菌十分钟,4℃放2-3天。应该是灭菌过了

好的,我试试,非常感谢
9楼2016-04-14 14:01:19
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hancy

新虫 (小有名气)

你的次氯酸钠溶液浓度太高了,我用0.1%bleach消毒十分钟,如果是新收的种子,春化一天就够了

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10楼2016-04-14 15:12:58
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